СМИ-4а 438190-29-5

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 273,23 SMI-4a является мощным ингибитором Pim1 с IC50 17 нМ, умеренно мощным по отношению к Pim-2, существенно не ингибирует другие серин / треонин- или тирозин. -киназы. \ n Биологическая активность SMI-4a является АТФ-конкурентным ингибитором Pim1 с IC50 17 нМ. SMI-4a показывает высокую селективность в отношении Pim1 против группы киназ. SMI-4a ингибирует in vitro фосфорилирование Pim-1 известного субстрата, репрессора трансляции 4E-BP1. SMI-4a (5 мкм) подавляет рост клеток поджелудочной железы и лейкозов. SMI-4a снижает фосфорилирование мишени Bad Pim в простате и гематопоэтических клетках. SMI-4a вызывает остановку клеточного цикла и обращает антиапоптотическую активность Pim-1. SMI-4a увеличивает количество p27Kip1 в ядре. Обработка пре-T-LBL SMI-4a ингибирует путь mTOR. SMI-4a снижает экспрессию белка MYC в пре-T-LBL. Обработка SMI-4a индуцирует повышенную регуляцию пути MAPK. Обработка SMI-4a (60 мг / кг) два раза в день значительно уменьшает размер опухоли и хорошо переносится. Опухоли, собранные через 1 час после последнего перорального введения SMI-4a через зонд, демонстрируют пониженное фосфорилирование p70 S6K по сравнению с опухолями от мышей, обработанных носителем, тогда как для сравнения общая экспрессия p70 S6K не изменилась. \ n Анализ киназной активности Значения IC50 для ингибиторов Pim измеряются с помощью анализа сопряженной киназы, как описано ранее, со следующими изменениями: анализы проводят в 20 мМ MOPS, содержащих 100 мМ NaCl, 10 мМ MgCl2, 2,5 мМ фосфоенолпируват, 0,2 мМ NADH, 30 мкг / мл пируваткиназы, 10 мкг / мл лактатдегидрогеназы, 2 мМ DTT и 25 нМ Pim-1 с 100 мкМ пептида. Активность измеряют путем мониторинга окисления НАДН по уменьшению при 340 нм в считывающем устройстве для микропланшетов VersaMax при 25 ℃. Реакции инициируются добавлением АТФ (100 мкМ), а ингибиторы (конечный 1% ДМСО) добавляются непосредственно перед добавлением АТФ. Значения IC50 определяют с помощью нелинейной регрессии в программе GraphPad Prism. Этот анализ определяет активность киназы путем измерения количества продуцируемого АДФ, который связан с окислением НАДН лактатдегидрогеназой и пируваткиназой. Способность киназы Pim-1 фосфорилировать полноразмерные белковые субстраты 4E-BP1 и p27Kip1 определяется следующим образом: очищенный Pim-1 (1 нг) добавляется вместе с 4E-BP1 (2 мкг) или p27Kip1 (2 мкг) и ингибитором Pim. в буфере для анализа [20 мМ MOPS (pH 7), содержащий 100 мМ NaCl, 10 мМ MgCl2 и 2 мМ DTT]. Анализы инициируют добавлением АТФ (100 мкМ) и [γ-32P] АТФ (10 мкКи). Реакции позволяют протекать в течение 15 минут при 30 ° C, а затем разделяют с помощью SDS-PAGE. 32P-фосфорилированные субстраты визуализируются авторадиографией и количественно определяются денситометрией.

Группа Продуктов : Эпигенетика > Ингибитор пима