.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 548,63 ICG-001 противодействует транскрипции, опосредованной Wnt / β-катенином / TCF, и специфически связывается с элемент-связывающим белком (CBP) с IC50 3 мкМ, но не родственный коактиватор транскрипции p300. \ n Биологическая активность ICG-001 не влияет на родственную репортерную конструкцию, FOPFLASH, которая содержит мутированные сайты TCF. После обработки 25 мкМ ICG-001 в течение 8 часов клетки SW480 снижают стационарные уровни РНК и белка сурвивина и циклина D1, оба из которых могут быть активированы β-катенином. ICG-001 избирательно индуцирует апоптоз в трансформированных клетках, но не в нормальных клетках толстой кишки, снижает in vitro рост клеток карциномы толстой кишки. ICG-001 может фенотипически восстанавливать индуцированную нормальным фактором роста нервов (NGF) дифференцировку нейронов и рост нейритов в мутантных клетках пресенилина-1, подчеркивая важность пути передачи сигналов TCF / β-катенина в росте нейритов и дифференцировке нейронов. Недавнее исследование демонстрирует, что 5 мкМ ICG-001 ингибирует индуцированную лептином ЭМП, инвазию и образование опухолевых сфер в клетках MCF7. Введение водорастворимого аналога ICG-001 в течение 9 недель снижает образование полипов толстой и тонкой кишки на 42% так же эффективно, как нестероидное противовоспалительное средство Сулиндак, эффективность которого постоянно демонстрируется на этой модели. На протяжении всего курса лечения явной токсичности не обнаруживается. В модели регрессии опухоли ксенотрансплантата мыши SW620, 150 мг / кг, внутривенное введение аналога демонстрирует резкое уменьшение объема опухоли в течение 19-дневного курса лечения без смертности или потери веса. ICG-001 (5 мг / кг в день) значительно подавляет передачу сигналов бета-катенина и ослабляет вызванный блеомицином фиброз легких у мышей, одновременно сохраняя эпителий. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
DUAL-Luciferase Reporter Assay
|
The Dual-Luciferase Reporter (DLR) Assay System provides an efficient means of performing dual reporter assays. In the DLRTM Assay, the activities of firefly (Photinus pyralis) and Renilla (Renilla reniformis, also known as sea pansy) luciferases are measured sequentially from a single sample. The firefly luciferase reporter is measured first by adding Luciferase Assay Reagent II (LAR II) to generate a [glow-type" luminescent signal. After quantifying the firefly luminescence, this reaction is quenched, and the Renilla luciferase reaction is initiated by simultaneously adding Stop & Glo® Reagent to the same tube. The Stop & Glo® Reagent also produces a [glow-type" signal from the Renilla luciferase, which decays slowly over the course of the measurement. In the DLRTM Assay System, both reporters yield linear assays with subattomole (TM Assay provides rapid quantitation of both reporters either in transfected cells or in cell-free transcription/translation reactions.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
Human colon carcinoma cell lines SW480, SW620, and HCT116, normal colonic epithelial cell line CCD-841Co
|
|
Concentrations
|
~25 μM
|
|
Incubation Time
|
24 hours
|
|
Method
|
1. Prior to starting the assay, prepare the Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent, and mix thoroughly.
2. For best results, empirical determination of the optimal cell number, apoptosis induction treatment and incubation period for the cell culture system may be necessary.
3. Use identical cell numbers and volumes for the assay and the negative control samples.
4. Do not mix Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent and samples by manual pipetting. Mixing in this manner is unnecessary and may create bubbles that interfere with fluorescence readings or cross-contaminate the samples. Gentle mixing may be performed using a plate shaker.
5. Total incubation time for the assay depends upon the amount of
caspase- 3/7 present in the sample.
6. The Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent is formulated to mediate cellular lysis and support optimal caspase-3/7 activity. In rare instances, the reagent does not affect complete lysis of cultured cells. In such cases, lysis is enhanced by a freeze-thaw cycle. For best results, freeze at -70 °C, then thaw at room temperature. After equilibration, mix to homogeneity and incubate until measurable fluorescence is achieved
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
Seven-week-old male C57BL/6J-Apc Min/+
|
|
Formulation
|
Water-soluble analog of ICG-001 is used.
|
|
Dosages
|
300 mg/kg
|
|
Administration
|
Water-soluble analog of ICG-001 is treated orally for 9 weeks everyday.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
548.63
|
|
Formula
|
C33H32N4O4
|
|
CAS No.
|
780757-88-2
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
100 mg/mL
(182.27 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
35 mg/mL
(63.79 mM)
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
(6S,9aS)-6-(4-hydroxybenzyl)-N-benzyl-8-(naphthalen-1-ylmethyl)-4,7-dioxo-hexahydro-2H-pyrazino[1,2-a]pyrimidine-1(6H)-carboxamide
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Цитоскелетная передача сигналов > Ингибитор Wnt / бета-катенина
