.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 607,62 Торин 1 - мощный ингибитор mTORC1 / 2 с IC50 2 нМ / 10 нМ; проявляет 1000-кратную селективность для mTOR, чем PI3K. \ n Torin1 ингибирует фосфорилирование субстратов mTORC1 и mTORC2 в клетках при концентрациях 2 и 10 нМ соответственно. Более того, Torin1 проявляет 1000-кратную селективность в отношении mTOR по сравнению с PI3K (EC50 = 1800 нМ) и демонстрирует 100-кратную селективность связывания по сравнению с 450 другими протеинкиназами. Torin1 вызывает остановку клеточного цикла через механизм устойчивости к рапамицину, который также не зависит от mTORC2. Torin1 разрушает mTORC1-зависимые фенотипы более полно, чем рапамицин. Устойчивые к рапамицину функции mTORC1 необходимы для кэп-зависимой трансляции. В недавнем исследовании сообщается, что Torin1 увеличивает секрецию нейротензина и экспрессию гена за счет активации пути MEK / ERK / c-Jun в линии эндокринных клеток человека BON. Torin1 эффективен в дозе 20 мг / кг в ксенотрансплантате U87MG. модель и демонстрирует хорошее фармакодинамическое ингибирование нижестоящих эффекторов mTOR в опухоли и периферических тканях. \ п
|
mTORC1 and mTORC2 in Vitro Kinase Assays
|
To produce soluble mTORC1, HEK-293T cell lines that stably express N-terminally FLAG-tagged Raptor are generated using vesicular stomatitis virus G-pseudotyped MSCV retrovirus. For mTORC2, similar HeLa cells that stably express N-terminally FLAG-tagged Protor-1 are generated. Both complexes are purified by lysing cells in 50 mm HEPES, pH 7.4, 10 mm sodium pyrophosphate, 10 mm sodium β-glycerophosphate, 100 mm NaCl, 2 mm EDTA, 0.3% CHAPS. Cells are lysed at 4 °C for 30 min, and the insoluble fraction is removed by microcentrifugation at 13,000 rpm for 10 min. Supernatants are incubated with FLAG-M2 monoclonal antibody-agarose for 1 h and then washed three times with lysis buffer and once with lysis buffer containing a final concentration of 0.5 M NaCl. Purified mTORC1 is eluted with 100 μg/mL 3×FLAG peptide in 50 mm HEPES, pH 7.4, 100 mm NaCl. Eluate can be aliquoted and stored at -80 °C. Substrates S6K1 and Akt1 are purified. Kinase assays are performed for 20 min at 30 °C in a final volume of 20 μL consisting of the kinase buffer (25 mm HEPES, pH 7.4, 50 mm KCl, 10 mm MgCl2, 500 μm ATP) and 150 ng of inactive S6K1 or Akt1 as substrates. Reactions are stopped by the addition of 80 μL of sample buffer and boiled for 5 min. Samples are subsequently analyzed by SDS-PAGE and immunoblotting.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
MEFs
|
|
Concentrations
|
~250 nM
|
|
Incubation Time
|
4 days
|
|
Method
|
Cell viability is assessed with the CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay. On Day 0, 96-well plates are seeded with 500 cells per well and grown overnight. On Day 1, cells are treated with the appropriate compounds and subsequently analyzed on Days 3-5. For analysis, plates are incubated for 60 min at room temperature; 50 μL of CellTiter-Glo reagent is added to each well, and plates are mixed on an orbital shaker for 12 min. Luminescence is quantified on a standard plate luminometer.
|
Исследование на животных: [2]
|
Animal Models
|
U87MG xenograft model
|
|
Formulation
|
Torin1 powder is first dissolved at 25 mg/mL in 100% N-methyl-2-pyrrolidone and subsequently diluted 1:4 with sterile 50% PEG400 to a final concentration of 5 mg/mL
|
|
Dosages
|
20 mg/kg
|
|
Administration
|
Administered via i.p. once daily
|
|
Solubility
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol,
30 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
607.62
|
|
Formula
|
C35H28F3N5O2
|
|
CAS No.
|
1222998-36-8
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
2 mg/mL
(3.29 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
In vivo
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
Benzo[h]-1,6-naphthyridin-2(1H)-one, 1-[4-[4-(1-oxopropyl)-1-piperazinyl]-3-(trifluoromethyl)phenyl]-9-(3-quinolinyl)-
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : PI3K / Akt / mTOR > mTOR ингибитор
