.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 318,76 BIIB021 представляет собой пероральный полностью синтетический низкомолекулярный ингибитор HSP90 с Ki и EC50 1,7 нМ и 38 нМ, соответственно. Фаза 2. \ n Биологическая активность BIIB021 связывается в АТФ-связывающем кармане Hsp90, нарушает функцию шаперона Hsp90 и приводит к деградации клиентского белка и ингибированию роста опухоли. BIIB021 подавляет пролиферацию опухолевых клеток (BT474, MCF-7, N87, HT29, H1650, H1299, H69 и H82) с IC50 от 0,06-0,31 мкМ. BIIB021 вызывает деградацию клиентских белков Hsp90, включая HER-2, Akt и Raf-1, и повышенную экспрессию белков теплового шока Hsp70 и Hsp27. BIIB021 ингибирует клетки лимфомы Ходжкина (KM-H2, L428, L540, L540cy, L591, L1236 и DEV) с IC50 от 0,24-0,8 мкМ. BIIB021 показывает низкую активность в лимфоцитах здоровых людей. BIIB021 ингибирует конститутивную активность NF-κB, несмотря на дефектный IκB. BIIB021 индуцирует экспрессию лигандов для активирующего рецептора NK-клеток NKG2D на клетках лимфомы Ходжкина, что приводит к повышенной чувствительности к киллингу, опосредованному NK-клетками. BIIB021 усиливал радиочувствительность in vitro клеточных линий HNSCCA (UM11B и JHU12) с соответствующим снижением экспрессии ключевых радиореактивных белков, увеличивал апоптотические клетки и усиливал арест G2. BIIB021 значительно более активен, чем 17-AAG, против карциномы коры надпочечников H295R как in vitro, так и in vivo. На цитотоксическую активность BIIB021 не влияет потеря NQO1 или сверхэкспрессия Bcl-2, молекулярные повреждения, которые не предотвращают потерю клиента, но, тем не менее, связаны с уменьшением гибели клеток 17-AAG. BIIB021 также активен в устойчивых к 17-AAG клеточных линиях (NIH-H69, MES SA Dx5, NCI-ADR-RES, Nalm6 и др.). Пероральное введение BIIB021 приводит к ингибированию роста опухоли во многих моделях ксенотрансплантатов опухоли, включая N87, BT474, CWR22, U87, SKOV3 и Panc-1. BIIB021 эффективно подавляет рост опухоли L540cy в дозе 120 мг / кг. BIIB021 значительно усиливает противоопухолевый эффект радиации в ксенотрансплантате JHU12. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
Hsp90 Binding Assay
|
For fluorescence polarization competition measurements, the FITC-geldanamycin probe (20 nM) is reduced with 2 mM TCEP at room temperature for 3 hours, after which the solution is aliquoted and stored at -80 °C until used. Recombinant human Hsp90α (0.8 nM) and reduced FITC-geldanamycin (2 nM) are incubated in a 96-well microplate at room temperature for 3 hours in the presence of assay buffer containing 20 mM HEPES (pH 7.4), 50 mM KCl, 5 mM MgCl2, 20 mM Na2MoO4, 2 mM DTT, 0.1 mg/mL BGG, and 0.1% (v/v) CHAPS. Following this preincubation, BIIB021 in 100% DMSO is then added to final concentrations of 0.2 nM to 10 μM (final volume 100 μL, 2% DMSO). The reaction is incubated for 16 hours at room temperature and fluorescence is then measured in an Analyst plate reader, excitation = 485 nm, emission = 535 nm. High and low controls contained no BIIB021 or no Hsp90, respectively. The data are fit to a four-parameter curve and IC50 is generated.
|
|
HER-2 Degradation Assay
|
MCF-7 cells (5 × 105) in complete DMEM are seeded per well in 24-well plates. The cells are propagated for 24 hours before BIIB021 addition. BIIB021 (1 mM) is prepared in DMSO and serially diluted in complete DMEM. Cells are incubated in the pr
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
BT474, MCF-7, N87, HT29, H1650, H1299, H69 and H82 cells
|
|
Concentrations
|
3 nM - 1 μM
|
|
Incubation Time
|
5 days
|
|
Method
|
A modified tetrazolium salt assay is used to measure the IC50. Tumor cells are added to 96-well plates and propagated for 24 hours before BIIB021 addition. BIIB021 is added to the plated cells. DMSO (0.03-0.003%) is included as a vehicle control. After incubation phenazine methosulfate (stock concentration 1 mg/mL) and 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt (stock concentration 2 mg/mL) are mixed at a ratio of 1:20 and added to each well of a 96-well plate. Reduction of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt gives rise to a soluble formazan product that is secreted into the culture medium. After 4 hours incubation, the formazan product is quantitated spectrophotometrically at a wavelength of 490 nm. Data are acquired using SOFTmaxPRO software, and 100% viability is defined as the A490 of DMSO-treated cells stained with 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt (the mean A490 of cells treated with DMSO at a range of 0.03-0.003%). Percent viability of each sample is calculated from the A490 values as follows: % viability = (A490 nm sample / A490 nm DMSO-treated cells × 100). The IC50 is defined as the concentration that gives rise to 50% inhibition of cell viabilit
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
N87, BT474, CWR22, U87, SKOV3 and Panc-1 tumor models in BALB/c and athymic mice
|
|
Formulation
|
Phospho-lipon/sucrose emulsion [2]
|
|
Dosages
|
31, 62.5, and 125 mg/kg
|
|
Administration
|
Orally administered once daily
|
|
Solubility
|
30% propylene glycol, 5% Tween 80, 65% D5W,
30 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
318.76
|
|
Formula
|
C14H15ClN6O
|
|
CAS No.
|
848695-25-0
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
CNF2024
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
64 mg/mL
(200.77 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
2 mg/mL
(6.27 mM)
|
|
In vivo
|
30% propylene glycol, 5% Tween 80, 65% D5W
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
6-chloro-9-((4-methoxy-3,5-dimethylpyridin-2-yl)methyl)-9H-purin-2-amine
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Цитоскелетная передача сигналов > Ингибитор HSP
