.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 560,64 Гельданамицин - природный существующий ингибитор HSP90 с Kd 1,2 мкМ, специфически разрушает ассоциацию глюкокортикоидных рецепторов (GR) / HSP. \ n Биологическая активность Гелданамицин связывается в ATP- сайт связывания в N-концевом домене Hsp90 (остатки 1-220). Гелданамицин дозозависимо ингибирует АТФазную активность Hsp90. Гелданамицин вызывает дозозависимую остановку G2 и обратимое ингибирование входа в S-фазу в линии клеток яичников человека A2780. Это ингибирование сопровождается увеличением p53 и, наконец, продемонстрировано, что оно зависит от p53. Гелданамицин вызывает полиубиквитинирование и протеасомную деградацию протеин-тирозинкиназы рецептора p185, и его IC50 составляет 70 нМ. Гелданамицин представляет собой типичный противоопухолевый реагент, имеет средний GI50 0,18 мкМ по сравнению с панелью из 60 линий опухолевых клеток человека. Гелданамицин (50 мг / кг) демонстрирует 30% ингибирование уровней фосфотирозина, связанного с р185, у мышей FRE / erbB-2. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
Isothermal Titration Calorimetry (ITC) of Nucelotide Binding
|
The titration experiments are performed using the MSC system. In each experiment, 16 aliquots of 15 μL of geldanamycin (300 μM in 1% DMSO) are injected into 1.3 mL of protein (31 μM in 20 mMTris-HCl, pH 7.5, 1 mMEDTA) at 25 °C, and the resulting data are fit after subtracting the heats of dilution. Heats of dilution are determined in separate experiments from addition of geldanamycin into buffer and buffer into protein. No evidence for binding of DMSO in the nucleotide binding site is observed. Titration data are fit using a nonlinear least-squares curve-fitting algorithm with three floating variables: stoichiometry, binding constant (Kb) 1/Kd), and change of enthalpy of interaction (ΔH°). Dissociation constants estimated for geldanamycin binding to intact yeast Hsp90 is 1.22 μM, and for binding to Hsp90 N-terminal domain is 0.78 μM. No meaningful heat is observed with binding to the C-terminal fragment.
|
|
ATPase Assay
|
The ATPase assay is based on a regenerating coupled enzyme assay in which the phosphorylation of ADP by pyruvate kinase at the expense of phosphoenolpyruvate is coupled to the reduction of the resulting pyruvate by lactate dehydrogenase at the expense of
|
Клеточный анализ: [2]
|
Cell lines
|
A2780 human ovarian cell line
|
|
Concentrations
|
0.001-10 μM
|
|
Incubation Time
|
3 hours
|
|
Method
|
Exponentially growing cells are treated with Geldanamycin and at various times DNA synthesis is assessed by incorporation of bromodeoxyuridine (BrdUrd) and flow cytometric analysis. No marked difference in total cell number is noted during this time course for treated and untreated cultures. BrdUrd (10 μM) is incorporated over a 4-h incubation period at 37 °C and cells are harvested and fixed in 70% ethanol. After denaturation of the DNA with 2 N HC1, cells are incubated with an anti-BrdUrd mouse monoclonal antibody followed by a fluorescein isothiocyanate (FITC)-linked goat anti-mouse IgG. Cells are stained for 30 minutes at room temperature with propidium iodide and analysed by flow cytometry using a Coulter EPICS Profile Analyzer.
|
Исследование на животных: [6]
|
Animal Models
|
FRE/erbB-2 tumors in nu/nu mice
|
|
Formulation
|
Geldanamycin is dissolved in DMSO.
|
|
Dosages
|
50 mg/kg
|
|
Administration
|
Administered via i.p.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
560.64
|
|
Formula
|
C29H40N2O9
|
|
CAS No.
|
30562-34-6
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
NSC 122750
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
100 mg/mL
heating
(178.36 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
2-Azabicyclo[16.3.1]docosa-4,6,10,18,21-pentaene-3,20,22-trione, 9,13-dihydroxy-8,14,19-trimethoxy-4,10,12,16-tetramethyl-, 9-carbamate
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Цитоскелетная передача сигналов > Ингибитор HSP
