ТСУ-68 (SU6668, Орантиниб) 252916-29-3

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 310,35 TSU-68 (SU6668, Орантиниб) имеет наибольшую эффективность против аутофосфорилирования PDGFR с Ki 8 нМ, но также сильно ингибирует трансфосфорилирование Flk-1 и FGFR1, мало активность против IGF-1R, Met, Src, Lck, Zap70, Abl и CDK2; не ингибирует EGFR. Фаза 3. \ n Биологическая активность TSU-68 является конкурентным ингибитором в отношении АТФ трансфосфорилирования Flk-1 / KDR, трансфосфорилирования FGFR1 и аутофосфорилирования киназ PDGFRβ. TSU-68 (0,03-10 мкМ) ингибирует фосфорилирование тирозина KDR в HUVEC, стимулированных VEGF. TSU-68 также ингибирует стимулированное PDGF фосфорилирование тирозина PDGFRβ в клетках NIH-3T3, сверхэкспрессирующих PDGFRβ, в минимальной концентрации 0,03-0,1 мкМ. TSU-68 ингибирует индуцированное кислотой FGF фосфорилирование субстрата 2 FGFR1 при 10 мкМ и выше. Однако TSU-68 (до 100 мкМ) не влияет на стимулированное EGF фосфорилирование тирозина EGFR в клетках NIH-3T3, сверхэкспрессирующих EGFR. TSU-68 ингибирует управляемый VEGF и управляемый FGF митогенез HUVEC со средним значением IC50 0,34 мкМ и 9,6 мкМ, соответственно. В клетках миелоидного лейкоза человека MO7E TSU-68 ингибирует тирозиновое аутофосфорилирование рецептора фактора стволовых клеток (SCF), c-kit, с IC50 0,1-1 мкМ, а также фосфорилирование ERK1 / 2, сигнальное событие ниже c- комплект активации. TSU-68 также ингибирует SCF-индуцированную пролиферацию клеток MO7E с IC50 0,29 мкМ и индуцирует апоптоз. TSU-68 (75-200 мг / кг) индуцирует ингибирование роста опухоли против широкого диапазона типов опухолей в моделях ксенотрансплантатов у бестимусных мышей, включая клетки A375, Colo205, H460, Calu-6, C6, SF763T и SKOV3TP5. TSU-68 (75 мг / кг) также подавляет опухолевый ангиогенез ксенотрансплантатов глиомы С6. В модели опухоли карциномы толстой кишки человека HT29 TSU-68 (200 мг / кг) снижает среднюю проницаемость сосудов и средний фракционный объем плазмы в крае и ядре опухоли. TSU-68 способствует аномальному развитию стромы на периферии карцином. В модели опухоли печени кролика VX2 TSU-68 (200 мг / кг) усиливает эффект химиотерапевтического вливания. \ n Реакции трансфосфорилирования. Анализы тирозинкиназы для количественного определения активности трансфосфорилирования Flk-1 и FGFR1 проводят в 96-луночных микротитровальных планшетах, предварительно покрытых (20 мкг / лунка в PBS; инкубируют в течение ночи при 4 ° C) с пептидным субстратом. поли-Glu, Тир (4: 1). Избыточные сайты связывания с белками блокируются 1-5% (мас. / Об.) BSA в PBS. Очищенные слитые белки GST-FGFR1 (киназный домен) или GST-Flk-1 (цитоплазматический домен) затем добавляют в лунки для микротитрования в буфере для разведения киназы с 2-кратной концентрацией, состоящем из 100 мМ HEPES, 50 мМ NaCl, 40 мкМ NaVO4 и 0,02 % (мас. / об.) BSA. Конечная концентрация фермента для GST-Flk-1 и GST-FGFR1 составляет 50 нг / мл. SU6668 растворяют в ДМСО в 100-кратной конечной требуемой концентрации и разбавляют 1:25 в H2O. Затем в каждую реакционную лунку добавляют двадцать пять мкл разбавленного SU6668. Киназная реакция инициируется добавлением различных концентраций АТФ в раствор MnCl2, так что конечные концентрации АТФ превышают Km для фермента, а конечная концентрация MnCl2 составляет 10 мМ. Планшеты инкубируют 5-15 мин при комнатной температуре перед остановкой реакции добавлением ЭДТА. Затем планшеты трижды промывают TBST. Кроличьи поликлональные антифосфотирозиновые антисыворотки добавляют в лунки при разведении 1: 10000 в TBST, содержащем 0,5% (мас. / Об.) BSA, 0,025% (мас. / Об.) Обезжиренного сухого молока и 100 мкМ NaVO4, и инкубируют в течение 1 часа при 37 °. С. Затем планшеты трижды промывают TBST с последующим добавлением козьей антикроличьей антисыворотки, конъюгированной с HRP. Планшеты инкубируют в течение 1 часа при 37 ° C, а затем трижды промывают TBST. Количество фосфотирозина в каждой лунке определяется количественно после добавления 2,2 Метод \ n Клетки засеваются (3 × 105 клеток / 35-мм лунка) в DMEM, содержащей 10% (об. / Об.) FBS, и растут до слияния, а затем успокаивается в среде DMEM, содержащей 0,1% сыворотки, в течение 2 часов до лечения препаратом. HUVEC (засеянные из расчета 2 × 10 6 клеток / 10-см планшет) выращивают до слияния в среде для роста эндотелиальных клеток и затем помещают в базальную среду для эндотелиальных клеток, содержащую 0,5% FBS, в течение 24 часов перед обработкой лекарственным средством. Все линии клеток инкубируют с SU6668 в течение 1 часа перед стимуляцией лигандом (100 нг / мл) в течение 10 минут. Вестерн-блоттинг выполняется \ n

Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор VEGFR