.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 390,41 PF-4708671 представляет собой проницаемый для клеток ингибитор p70 рибосомальной киназы S6 (изоформа S6K1) с Ki / IC50 20 нМ / 160 нМ, что в 400 раз больше селективности для S6K1 чем S6K2, и 4- и> 20-кратная селективность для S6K1, чем MSK1 и RSK1 / 2, соответственно. Первый ингибитор S6K1, о котором будет сообщено. \ N PF-4708671 - аналог пиперазинилпиримидина и первый ингибитор S6K1. PF-4708671 существенно не ингибирует активность тесно связанной изоформы S6K2 или ряда других киназ AGC (Akt1, Akt2, PKA, PKCα, PKCϵ, PRK2, ROCK2, RSK1, RSK2 или SGK1). PF-4708671 предотвращает опосредованное S6K1 фосфорилирование белка S6 в ответ на IGF-1 (инсулиноподобный фактор роста 1), в то же время не влияя на фосфорилирование, индуцированное PMA, субстратов высокосвязанного RSK (рибосомная киназа S6 p90) и киназы MSK (митоген- и стресс-активируемые киназы). Также обнаружено, что PF-4708671 индуцирует фосфорилирование Т-петли и гидрофобного мотива S6K1, эффект, который зависит от mTORC1 (комплекс mTOR 1). PF-4708671 не влияет на активность mTORC1. \ n Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
Protein kinase activity assays
|
For selectivity IC50 assays, purified active GST–S6K1, GST–S6K2, His–MSK1 (residues 2–802), His–RSK1 (residues 1–735) and His–RSK2 (residues 2–740) (0.5 units/mL) are assayed for 30 min at 30 °C in a 50 μL assay mixture in buffer A containing either 30 μM Crosstide (GRPRTSSFAEG, for S6K1, S6K2 and MSK1) or 30 μM Long S6 (KEAKEKRQEQIAKRRRLSSLRASTSKSGGSQK, for RSK1 and RSK2), 10 mM magnesium acetate and 100 μM [γ- 32P]ATP. Reactions are terminated and the incorporation of [γ-32P]phosphate into the peptide substrate is determined by applying the reaction mixture on to P81 phosphocellulose paper and scintillation counting after washing the papers in phosphoric acid. One unit of activity is defined as that which catalysed the incorporation of 1 nmol of [32P]phosphate into the substrate. To determine the Ki for PF-4708671, full-length recombinant S6K1 is added to a final concentration of 5 nM to Omnia assay buffer containing various concentrations of compound. The reaction is run for 60 min at 30 °C in a 50 μL assay volume. The fluorescence of the peptide is monitored at an excitation wavelength of 360 nm and an emission wavelength of 485 nm. The rate of the reaction at each compound concentration is normalized to the DMSO control rate, and this normalized rate against concentration is fitted to the Morrison tight-binding equation for a competitive inhibitor to provide the true Ki. In order to assay S6K activity in HEK-293 cell lysates, cells are lysed in Tris lysis buffer. Lysate (0.5 mg) is incubated with 5 μg of S6K antibody conjugated to Protein G–Sepharose for 1 h at 4 °C on a vibrating platform. Immunoprecipitates are washed twice with lysis buffer and twice with buffer A, and kinase activity is assayed exactly as described above using the Crosstide peptide.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
\ n Химическая информация Скачать PF-4708671 SDF
|
Molecular Weight (MW)
|
390.41
|
|
Formula
|
C19H21F3N6
|
|
CAS No.
|
1255517-76-0
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
30 mg/mL
(76.84 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
8 mg/mL
(20.49 mM)
|
|
In vivo
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
1H-Benzimidazole, 2-[[4-(5-ethyl-4-pyrimidinyl)-1-piperazinyl]methyl]-6-(trifluoromethyl)-
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : PI3K / Akt / mTOR > Ингибитор киназы S6
