.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 358,54 Салиразиб - мощный конкурентный ингибитор пренилированной протеинметилтрансферазы (PPMTase) с Ki 2,6 мкМ, который ингибирует метилирование Ras. Фаза 2. \ n Биологическая активность Салирасиб подавляет рост человеческих Ha-ras-трансформированных клеток Rat1, что хорошо коррелирует с их ингибированием PPMTase. Салиразиб подавляет метилирование Ras в фибробластах крысы-1, трансформированных Ras клетках меланомы крысы-1 и B16. Салирасиб также снижает уровни Ras в клеточных мембранах и ингибирует Ras-зависимый рост клеток, независимо от метилирования, но посредством модуляции связи Ras-Raf. В Ras-трансформированных клетках EJ салиразиб препятствует активации Raf-1 и MAPK и подавляет синтез ДНК. У голых мышей с ксенотрансплантатом Panc-1 салиразиб (5 мг / кг внутрибрюшинно) заметно подавляет рост опухоли без системной токсичности. У самцов крыс Wistar салиразиб (5 мг / кг внутрибрюшинно) заметно подавляет индуцированный тиоацетамидом цирроз печени. В модели врожденной мышечной дистрофии на мышах dy (2J) / dy (2J) салиразиб (5 мг / кг внутрибрюшинно) ослабляет фиброз и увеличивает мышечную силу. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [2]
|
PPMTase Assays
|
Synaptosomal membranes of rat brain cerebellum or total membranes of cultured cell lines (100,000 × g pellet) are used for methyltransferase assays in the cell-free systems. Methyltransferase assays are performed at 37°C in 50 mM Tris-HCl buffer, pH 7.4, using 100 μg of protein, 25 μM [methyl-3H]AdoMet (300,000 cpm/nmol), and 50 μM AFC (prepared as a stock solution in DMSO) in a total volume of 50 μL. DMSO concentration in all assays is 8%. Various AFC concentrations are used in several experiments as indicated in the text. Reactions are terminated after 10 min by addition of 500 μL of chloroform:methanol (1:1) with subsequent addition of 250 μL of H2O, mixing, and phase separation. A 125-μL portion of the chloroform phase is dried at 40°C, and 200 μl of 1 N NaOH, 1% SDS solution is added. The methanol thus formed is counted by the vapor phase equilibrium method. Typical background counts (no AFC added) are 50-100 cpm, while typical reactions with AFC yield 500-6,000 cpm. Assays are performed in triplicate, and background counts are subtracted. Methylation of endogenous substrates and gel electrophoresis are performed. Protein carboxyl methylation in intact cells is determined using 100 μCi/mL [methyl-3H]methionine. Cells are assayed in near confluent cultures grown in 10-cm plates with 5 mL of labeling medium.
|
Клеточный анализ: [2]
|
Cell lines
|
PC12, CHE, T-antigen-transformed CHE, endothelial cells, astrocytes, B16, Rat1, EJ, NIH3T3, v-Raf-transformed NIH3T3 cell lines
|
|
Concentrations
|
~100 μM
|
|
Incubation Time
|
10 days
|
|
Method
|
Cells are grown in 24-well plates. 2 h after plating, the cells receive either solvent or FTS freshly prepared from a stock solution to yield the final indicated concentrations in 0.1% DMSO. Media are replaced every 4 days with fresh medium containing the solvent or the drug. Separate experiments indicate that the solvent itself has no effect on cell growth. On the indicated days, the cells are detached from plates by trypsin/EDTA and counted under the light microscope. All assays are performed in quadruplicate. In parallel experiments, cells are stained either with trypan blue or with MTT, and the stained cells are examined under the light microscope. In some MTT-stained cultures, the cells are dissolved in 0.2 mL of 100% DMSO, and the extent of staining is determined spectrophotometrically using an enzyme-linked immunosorbent assay reader.
|
Исследование на животных: [4]
|
Animal Models
|
Panc-1 xenografted nude mice
|
|
Formulation
|
Ethanol
|
|
Dosages
|
5 mg/kg daily
|
|
Administration
|
i.p.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
358.54
|
|
Formula
|
C22H30O2S
|
|
CAS No.
|
162520-00-5
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
N/A
|
|
Chemical Name
|
2-((2E,6E)-3,7,11-trimethyldodeca-2,6,10-trienylthio)benzoic acid
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Клеточный цикл > Ро-ингибитор
