.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 530,96 NSC 23766 является ингибитором Rac GTPase, нацеленным на активацию Rac факторами обмена гуаниновых нуклеотидов (GEF) с IC50 ~ 50 мкМ; не ингибирует близкородственные мишени, Cdc42 или RhoA. \ n Биологическая активность Идентифицировано, что NSC23766 вписывается в поверхностную бороздку Rac1, которая, как известно, имеет решающее значение для спецификации GEF. NSC23766 эффективно ингибирует связывание и активацию Rac1 с помощью Rac-специфических GEF Trio или Tiam1 дозозависимым образом, не влияя на тесно связанное связывание Cdc42 или RhoA или активацию их соответствующими GEF или с взаимодействием Rac1 с BcrGAP или эффекторным PAK1. NSC 23766 активен в регуляции функций Rac GTPase на цитоскелете и многих клеточных функций, включая клеточный цикл, рост клеток, адгезию, миграцию и транскрипцию генов. NSC 23766 (50 мкМ) эффективно блокирует индуцированную сывороткой или тромбоцитарным фактором роста активацию Rac1 и образование ламеллиподий, не влияя на активность эндогенных Cdc42 или RhoA в клетках NIH 3T3. NSC 23766 снижает Trio или Tiam1, но не Vav, Lbc, Intersectin или конститутивно активный Rac1-мутант-стимулированный рост клеток NIH 3T3 и подавляет Trio, Tiam1 или Ras-индуцированную трансформацию клеток. NSC23766 дозозависимо подавляет пролиферацию клеток PC-3 и независимый от закрепления рост. 25 мкМ NSC23766 подавляет инвазию клеток PC-3 через матригель на 85%. 50 мкМ NSC 23766 подавляет тромбин-индуцированную активацию Rac1 и d Rac2 в тромбоцитах человека, а также агрегацию тромбоцитов. NSC23766 предотвращает продукцию Aβ40 и Aβ42 в клетках swAPP-HEK293, не влияя на Notch и sAPPα. NSC23766 предотвращает активность γ-секретазы в клетке, но не действует как прямой ингибитор γ-секретазы. NSC23766 дозозависимо снижает уровни секретируемого и внутриклеточного Aβ40 с IC50 48,94 мкМ. 50 мкМ NSC 23766 подавляет высвобождение Aβ42 на 57,97%. NSC23766 регулирует экспрессию эндотелиальной синтазы оксида азота и функцию эндотелия. 100 мкМ NSC23766 подавляет активность промотора eNOS на 60% в ЭК бычьей аорты и на 30–35% в клетках bEND.3. Ингибирование Rac1 с помощью NSC23766 дестабилизирует мРНК eNOS и сокращает период ее полужизни до 17 часов. NSC23766 дозозависимо ослабляет ACh-индуцированную релаксацию колец аорты мышей дикого типа. NSC23766 подавляет рост клеток и вызывает апоптоз. NSC23766 снижает жизнеспособность клеток MDA-MB-468 и MDA-MB-231 дозозависимым образом с IC50 ~ 10 мкМ, что не коррелирует со статусом рецептора эстрогена (ER), рецептора прогестерона (PR), Her2, и мутация р53. NSC23766 мало влияет на выживаемость нормальных эпителиальных клеток молочной железы MCF12A. После 24 часов воздействия NSC 23766 клетки MDA-MB-231 показывают увеличение с 41% до 65% в фазе G1 и сопутствующее снижение в фазах S и G2-M. 100 мкМ NSC23766 индуцирует шестикратное увеличение апоптоза MDA-MB-468. Ингибирование NSC23766 остановки клеточного цикла или апоптоза в клетках рака молочной железы опосредуется подавлением циклина D1, сурвивина и X-связанного ингибитора апоптоза белка. NSC23766 индуцирует мобилизацию гемопоэтических стволовых клеток / предшественников. Внутрибрюшинное введение NSC23766 (2,5 мг / кг) в `` плохо мобилизирующуюся линию мышей C57Bl / 6 приводит к двукратному увеличению циркулирующих гемопоэтических стволовых клеток / предшественников через 6 часов после инъекции. NSC23766 облегчает вызванное липополисахаридом острое повреждение легких у мышей. Обработка NSC23766 в дозе 1 или 3 мг / кг не только снижает инфильтрацию воспалительных клеток и активность МПО, но также ингибирует провоспалительные медиаторы, фактор некроза опухоли-α и интерлейкин-1β, экспрессию мРНК. NSC23766 также снижает накопление синего Эванса и альбумина в легких, зараженных LPS. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
Rho GTPase activity assay
|
Cells are grown in log phase in a 10-cm dish, and are starved in 0.5% serum medium or indicated otherwise for 24 h before lysis in a buffer containing 20 mM Tris HCl (pH 7.6), 100 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 1% Nonidet P-40, 10% glycerol, and 1× protease inhibitor mixture. Lysates are clarified, the protein concentrations are normalized, and the GTP-bound Rac1 in the lysates is measured by an effector domain pull-down assay. For the His6-PAK1 PBD pull-down assay, cell lysates are incubated with Ni2+-agarose-immobilized His6-PAK1 PBD domain (∼1 μg each) purified from E. coli for 30 min. The Ni2+-agarose co-precipitates are washed twice in the wash buffer and analyzed by immunoblotting with anti-Rac1 monoclonal antibody.
|
Клеточный анализ: [5]
|
Cell lines
|
Human breast cancer cells MDA-MB-468
|
|
Concentrations
|
0-100 μM
|
|
Incubation Time
|
2 days
|
|
Method
|
Cells (1.5 × 104/mL) are seeded in each well of 96-well tissue culture plates with 200 μL of medium. After 24 hours of plating, the medium is replaced with 200 μL of fresh medium containing NSC23766 at the indicated concentrations. At the end of the treatment period 20 μL of MTS solution are added to each well and incubated at 37 ℃ for 2 hours. Absorbance at 490 nm is read on a 96-well plate reader.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
530.96
|
|
Formula
|
C24H35N7.3HCl
|
|
CAS No.
|
1177865-17-6
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
106 mg/mL
(199.63 mM)
|
|
Water
|
106 mg/mL
(199.63 mM)
|
|
Ethanol
|
5 mg/mL
(9.41 mM)
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
N6-[2-[[4-(Diethylamino)-1-methylbu-tyl]amino]-6-methyl-4-pyrimidinyl]-2-methyl-4,6-qu-inolinediamine trihydrochloride
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Клеточный цикл > Ро-ингибитор
