.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 480,41 NVP-BEP800 - новый, полностью синтетический ингибитор HSP90β с IC50 58 нМ, проявляет> 70-кратную селективность против Grp94 и Trap-1 членов семейства Hsp90. \ n Биологическая активность NVP-BEP800 представляет собой АТФ-конкурентный ингибитор Hsp90β с IC50 58 нМ, проявляющий> 70-кратную селективность против Grp94 и Trap-1 членов семейства Hsp90 со значениями IC50 4,1 мкМ и 5,5 мкМ, соответственно. NVP-BEP800 не проявляет ингибирующей активности против близкородственной АТФазы GHKL, топоизомеразы II и структурно неродственной АТФазы, Hsp70 в концентрации 10 мкМ. NVP-BEP800 эффективно ингибирует пролиферацию различных линий опухолевых клеток со значениями GI50 в диапазоне от 38 нМ в A375 до 1,05 мкМ в PC3 и первичных опухолей человека со средним значением IC50 0,75 мкМ и IC70 1,8 мкМ. Обработка NVP-BEP800 в концентрации, в пять раз превышающей GI50, увеличивает процентное содержание фазы G2-M в клетках A2058 и A549 и фазы суб-G1 в клетках BT-474, HCT116, A2058 и A549 на 29,5%, 33,6%, 42,7%. , 12,1%, 5,9% и 7,1% соответственно. Обработка NVP-BEP800 вызывает дефосфорилирование Akt и ErbB2, деградацию ErbB2 и индукцию Hsp70 в зависимости от концентрации в клетках BT-474 со значениями IC50 218 нМ, 39,5 нМ, 137 нМ и 207 нМ соответственно. Пероральное введение NVP-BEP800 в дозе 15 или 30 мг / кг / день в течение 15 дней вызывает дозозависимое снижение уровней фосфорилирования B-Raf и Akt и демонстрирует значительную дозозависимую противоопухолевую эффективность в модели ксенотрансплантата меланомы A375 с T Значения / C 53% и 6% при дозе 15 и 30 мг / кг / день, соответственно, предполагают почти полное подавление опухоли при 30 мг / кг / день. Введение NVP-BEP800 вызывает дозозависимое увеличение диссоциации комплекса Hsp90-p23 и снижение уровней стационарного ErbB2, фосфо-Akt и фосфо-S6 в ксенотрансплантатах рака молочной железы BT-474 и проявляет значительную противоопухолевую активность с 38 % регрессии опухоли при дозе 30 мг / кг / день и T / C 36% при дозе 15 мг / кг / день. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
Competitive binding fluorescent polarization assay
|
Recombinant Hsp90β, TAMRA-radicicol, or various concentrations of NVP-BEP800 is added in assay buffer (50 mM TRIS pH 7.4, 5 mM MgCl2, 150 mM KCl, and 0.1% CHAPS), mixed, and incubated at room temperature for 30 to 45 minutes prior to reading. The 2D-FIDA-based HTS assay based on confocal technologies monitors the decreased fluorescence polarization on displacement of the high affinity ligand TAMRA-radicicol from Hsp90β by NVP-BEP800. The concentration of NVP-BEP800 which inhibits Hsp90β by 50% is determined from the competition curve.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
A375, PC3, A2058, A549, HCT116, BT-474, SKBr3, MCF-7, MDAMB-157, MDA-MB-231, MDA-MB-468, and BT20
|
|
Concentrations
|
Dissolved in DMSO as a 10 mM stock solution, final concentrations ~1 mM
|
|
Incubation Time
|
24 hours
|
|
Method
|
Cells are exposed to NVP-BEP800 for 24 hours. Cell proliferation is determined using either sulforhodamine B for adherent cells or MTS assay for suspension cells or those showing low adherence. Cell death is determined using a ToxiLight nondestructive cytotoxicity bioassay kit. Cell cycle progression is determined by RNase A/propidium iodide staining following fixation in 70% ethanol. Caspase-3/7 activity is determined using a homogeneous caspase activity kit.
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
Female Harlan HsdNpa: Athymic Nude-nu mice injected s.c. with BT-474 or A375 cells
|
|
Formulation
|
Formulated as a suspension in 0.5% methyl cellulose
|
|
Dosages
|
~50 mg/kg/day
|
|
Administration
|
Orally
|
|
Solubility
|
0.5% methylcellulose,
5 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
480.41
|
|
Formula
|
C21H23Cl2N5O2S
|
|
CAS No.
|
847559-80-2
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
VER82576
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
<1 mg/mL
(
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
15 mg/mL
(31.22 mM)
|
|
In vivo
|
0.5% methylcellulose
|
5 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
2-amino-4-(2,4-dichloro-5-(2-(pyrrolidin-1-yl)ethoxy)phenyl)-N-ethylthieno[2,3-d]pyrimidine-6-carboxamide
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Цитоскелетная передача сигналов > Ингибитор HSP
