CP-724714 537705-08-1

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 469,53 CP-724,714 - мощный селективный ингибитор HER2 / ErbB2 с IC50 10 нМ,> 640-кратной селективностью против EGFR, InsR, IRG-1R, PDGFR , VEGFR2, Abl, Src, c-Met и т. Д. Фаза 2. \ n Биологическая активность CP-724,714 селективно метится против EGFR с IC50 6,4 мкМ. CP-724,714 более чем в 1000 раз менее активен в отношении IR, IGF-1R, PDGFRβ, VGFR2, abl. Src, c-Met c-jun NH2-концевая киназа (JNK) -2, JNK-3, ZAP-70, циклин-зависимая киназа (CDK) -2 и CDK-5. CP-724,714 сильно снижает индуцированное EGF аутофосфорилирование химеры, содержащей киназный домен erbB2, с IC50 32 нМ, но заметно менее эффективно против EGFR в трансфицированных клетках NIH3T3. CP-724,714 чувствительно подавляет пролиферацию клеток, амплифицированных erbB2, включая BT-474 и SKBR3, с IC50 0,25 и 0,95 мкМ. CP-724,714 вызывает накопление клеток в фазе G1 и заметное снижение S-фазы в клетках BT-474 при 1 мкМ. CP-724,714, вероятно, проявляет свою гепатотоксичность через гепатоцеллюлярные повреждения и гепатобилиарный холестатический механизм. CP-724,714 демонстрирует ингибирование оттока холил-лизилфлуоресцеина и таурохолата (TC) в канальцы криоконсервированных и свежих культивированных гепатоцитов человека соответственно. CP-724,714 ингибирует транспорт TC в мембранных везикулах, экспрессирующих насос экспорта солей желчи человека, с IC50, равным 16 мкМ, и ингибирует главный переносчик оттока в желчных каналах, MDR1, с IC50 ~ 28 мкМ. СР-724,714 (25 мг / кг) быстро всасывается после перорального введения и вызывает снижение фосфорилирования рецептора erbB2 опухоли после введения дозы в ксенотрансплантаты FRE-erbB2 или BT-474. CP-724,714 индуцирует апоптоз у мышей, несущих ксенотрансплантат (sc) FRE-erbB2, и демонстрирует 50% ингибирование роста опухоли при 50 мг / кг без потери веса или смертности. CP-724,714 также обладает высокой противоопухолевой активностью в ксенотрансплантатах MDA-MB-453, MDA-MB-231, LoVo (толстая кишка) и Colo-205 (толстая кишка). Кроме того, CP-724,714 (30 или 100 мг / кг) снижает регулируемую внеклеточными сигналами киназу и фосфорилирование Akt в ксенотрансплантатах BT-474. \ n Киназные анализы Внутриклеточные домены рекомбинантного erbB2 (аминокислотные остатки 675-1255) и EGFR (аминокислотные остатки 668-1211) экспрессируются в инфицированных бакуловирусом клетках Sf9 в виде слитых белков глутатион-S-трансферазы. Белки очищают с помощью аффинной хроматографии на гранулах глутатион-сефарозы для использования в анализе. 96-луночные планшеты Nunc MaxiSorp покрывают инкубацией в течение ночи при 37 ° C со 100 мкл / лунку 0,25 мг / мл поли (Glu: Tyr, 4: 1), PGT в PBS. Избыток PGT удаляют путем аспирации, и планшет промывают 3 раза промывочным буфером (0,1% Tween 20 в PBS). Киназную реакцию проводят в 50 мкл 50 мМ HEPES (pH 7,4), содержащего 125 мМ хлорида натрия, 10 мМ хлорида магния, 0,1 мМ ортованадата натрия, 1 мМ АТФ и ~ 15 нг рекомбинантного белка. Добавлены ингибиторы в ДМСО; конечная концентрация ДМСО составляет 2,5%. Фосфорилирование инициируется добавлением АТФ и продолжается в течение 6 мин при комнатной температуре при постоянном встряхивании. Киназную реакцию останавливают путем аспирации реакционной смеси и четырехкратной промывки промывочным буфером. Фосфорилированный PGT измеряется после 25-минутной инкубации с 50 мкл / лунка конъюгированного с HRP антифосфотирозинового антитела PY54, разведенного до 0,2 мкг / мл в блокирующем буфере (3% BSA, 0,05% Tween 20 в PBS). Антитело удаляют путем аспирации, и планшет четыре раза промывают промывочным буфером. Колориметрический сигнал создается добавлением 50 мкл / лунка тетраметилбензидинового субстрата пероксидазы для микролунок и останавливается добавлением 50 мкл / лунка 0,09 м серной кислоты. Образовавшийся фосфотирозиновый продукт оценивают путем измерения оптической плотности при 450 нм. Сигнал для контролей обычно составляет A0,6–1,2, практически без фона в лунках без АТФ, киназного белка или PGT, и пропорционален времени инкубации в течение 6 минут. \ n Метод Клетки высевают дважды по 5 ~ 10 × 103 на лунку в 24-луночные планшеты. На следующий день после посева СР-724,714 добавляют титрованием в шести или более разведениях от 0,1 нМ до 10 мкМ. Также засеваются контрольные лунки без CP-724,714. Клетки выращивают в течение 6-7 дней, после чего подсчитывают выжившие клетки. После трипсинизации клетки помещают в изотоновый раствор и сразу же подсчитывают, используя счетчик частиц Coulter Z2. Подавление роста рассчитывается [(1- экспериментальное значение / контрольное значение) × 100] для каждой концентрации. Кривые "доза-ответ" повторяют не менее двух раз и усредняют. Значения IC50 рассчитываются с использованием программного обеспечения Calcusyn.

Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор HER2