Нератиниб (HKI-272) 698387-09-6

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 557,04 Нератиниб (HKI-272) - высокоселективный ингибитор HER2 и EGFR с IC50 59 и 92 нМ; слабо ингибирует KDR и Src, не ингибирует Akt, CDK1 / 2/4, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf и c-Met. Фаза 3. \ n Биологическая активность Нератиниб слабо ингибирует тирозинкиназы KDR и Src с IC50 0,8 мкМ и 1,4 мкМ соответственно, что в 14 и 24 раза менее активно по сравнению с HER2. Нератиниб не проявляет активности против других серин-треониновых киназ, таких как Akt, циклин D1 / cdk4, циклин E / cdk2, циклин B1 / cdk1, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf и Tpl-2, а также как тирозинкиназа c-Met. Нератиниб избирательно подавляет пролиферацию клеток 3T3, трансфицированных HER2 (3T3 / neu), а также двух других клеток SK-Br-3 и BT474 с избыточной экспрессией HER-2 со значениями IC50 2-3 нМ, отображая> 230-кратное эффективность по сравнению с нетрансфицированными клетками 3T3, а также с MDA-MB-435 и SW620, которые являются EGFR- и HER2-отрицательными. Нератиниб также подавляет пролиферацию EGFR-зависимых клеток A431 с IC50 81 нМ. Нератиниб снижает аутофосфорилирование рецептора HER2 в клетках BT474 с IC50 5 нМ и EGF-зависимое фосфорилирование EGFR в клетках A431 с IC50 3 нМ. Блокирование HER-2 с помощью Нератиниба приводит к ингибированию нижестоящих путей MAPK и Akt с IC50 2 нМ, более эффективно, чем трастузумаб. Нератиниб подавляет экспрессию циклина D1 и фосфорилирование продукции гена Rb-чувствительности в клетках BT474 с IC50 9 нМ, что приводит к остановке G1-S и, в конечном итоге, к снижению пролиферации клеток. Пероральный прием Нератиниба значительно подавляет рост ксенотрансплантатов 3T3 / neu с подавлением на 34%, 53%, 98% и 98% при дозах 10, 20, 40 и 80 мг / кг / день соответственно. В соответствии с подавлением фосфорилирования HER-2 на 84% в течение 1 часа после введения в дозе 40 мг / кг / день, Нератиниб подавляет рост ксенотрансплантатов BT474 на 70-82%, 67% и 93% в дозах 5, 10. и 40 мг / кг / день соответственно. Нератиниб также эффективен против ксенотрансплантатов SK-OV-3 с ингибированием 31% и 85% при дозах 5 и 60 мг / кг / день соответственно. Нератиниб менее эффективен против EGFR-зависимых ксенотрансплантатов A431, чем HER-2-зависимые опухоли, с 32% и 44% ингибированием при 5 и 20 мг / кг / день соответственно. Нератиниб проявляет небольшую активность против ксенотрансплантатов MCF-7 и MX-1, экспрессирующих низкие уровни HER-2 и EGFR, с только 28% ингибированием при 80 мг / кг / день, что позволяет предположить, что Нератиниб обладает селективной активностью в отношении клеток, экспрессирующих HER-2 или EGFR. . \ n Анализ бесклеточного аутофосфорилирования с использованием флуорометрии с временным разрешением. Нератиниб готовят в виде исходных растворов 10 мг / мл в ДМСО и разбавляют 25 мМ HEPES (pH 7,5; 0,002 нг / мл-20 мкг / мл). Очищенные рекомбинантные COOH-концевые фрагменты HER2 (аминокислоты 676-1255) или рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) (аминокислоты 645-1186) [разведенные в 100 мМ HEPES (pH 7,5) и 50% глицерине] инкубируются с возрастающими концентрациями Нератиниба в 4 мМ HEPES (pH 7,5), 0,4 мМ MnCl2, 20 мкМ ванадата натрия и 0,2 мМ DTT в течение 15 минут при комнатной температуре в 96-луночных планшетах для ELISA. Киназную реакцию инициируют добавлением 40 мкМ АТФ и 20 мМ MgCl2 и дают возможность протекать в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывают и фосфорилирование выявляют с использованием меченных европием антифосфотирозиновых антител (15 нг / лунку). После стадий промывки и улучшения сигнал детектируется с помощью флюоресцентного ридера Victor2 (длина волны возбуждения 340 нм, длина волны излучения 615 нм). Концентрация Нератиниба, которая ингибирует фосфорилирование рецептора на 50% (IC50), рассчитывается по кривым ингибирования. Метод Клетки подвергаются воздействию различных концентраций Нератиниба в течение 2 или 6 дней. Клеточную пролиферацию определяют с помощью сульфородамина B, красителя, связывающего белок. Вкратце, клетки фиксируют 10% трихлоруксусной кислотой и тщательно промывают водой. Затем клетки окрашивают 0,1% сульфородамином B и промывают 5% уксусной кислотой. Связанный с белком краситель солюбилизируется в 10 мМ Трис, и поглощение измеряется при 450 нМ. Концентрация Нератиниба, которая ингибирует пролиферацию клеток на 50% (IC50), определяется по кривым ингибирования.

Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор HER2