.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 356,17 BIO (6-броминдирубин-3'-оксим) является специфическим ингибитором GSK-3 с IC50 5 нМ для GSK-3α / β, показывает> 16-кратное селективность по отношению к CDK5, также являющемуся пан-JAK ингибитором. \ n BIO (6-броминдирубин-3'-оксим) является специфическим ингибитором киназы гликогенсинтазы-3 (GSK-3) с IC50 5 нМ для GSK-3α / β, показывает> 16-кратную селективность по CDK5. BIO взаимодействует внутри АТФ-связывающего кармана этих киназ, снижает фосфорилирование β-катенина на GSK-3-специфическом сайте в клеточных моделях, близко имитирует передачу сигналов Wnt у эмбрионов Xenopus. В эмбриональных стволовых клетках человека и мыши BIO поддерживает недифференцированный фенотип и поддерживает экспрессию специфичных для плюрипотентного состояния факторов транскрипции Oct-3/4, Rex-1 и Nanog. BIO-опосредованная активация Wnt является функционально обратимой, поскольку вывод соединения приводит к нормальным программам мультидифференцировки как в эмбриональных стволовых клетках человека, так и в мышиных эмбрионах. BIO способствует пролиферации кардиомиоцитов млекопитающих. 6BIO также является ингибитором пан-JAK со значениями IC50 0,03, 1,5, 8,0, 0,5 мкМ для TYK2, JAK1, JAK2 и JAK3. BIO избирательно подавляет фосфорилирование STAT3 и индуцирует апоптоз клеток меланомы человека. BIO подавляет рост опухоли меланомы в модели ксенотрансплантата мыши. Первый фармакологический агент, поддерживающий самообновление эмбриональных стволовых клеток человека и мыши. \ п
|
Kinase assay
|
Kinase activities are assayed in Buffer A or C at 30°C, at a final ATP concentration of 15 μM. Blank values are subtracted and activities calculated as pmoles of phosphate incorporated during a 10 min incubation. Controls are performed with appropriate dilutions of dimethylsulfoxide. In a few cases phosphorylation of the substrate is assessed by autoradiography after SDS-PAGE. GSK-3α/β is purified from porcine brain by affinity chromatography on immobilized axin. It is assayed, following a 1/100 dilution in 1 mg BSA/ml 10 mM DTT, with 5 μl 40 μM GS-1 peptide, a specific GSK-3 substrate, (YRRAAVPPSPSLSRHSSPHQSpEDEEE), in buffer A, in the presence of 15 μM [γ-32P] ATP (3,000 Ci/mmol; 1 mCi/ml) in a final volume of 30 μl. After 30 min incubation at 30°C, 25 μl aliquots of supernatant are spotted onto 2.5 × 3 cm pieces of Whatman P81 phosphocellulose paper, and 20 seconds later, the filters are washed five times (for at least 5 min each time) in a solution of 10 ml phosphoric acid/liter of water. The wet filters are counted in the presence of 1 ml ACS scintillation fluid.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
COS1, Hepa or SH-SY5Y cells
|
|
Concentrations
|
~10 μM
|
|
Incubation Time
|
12 or 24 h
|
|
Method
|
COS1, Hepa (wild-type, CEM/LM AhR deficient and ELB1 ARNT deficient), or SH-SY5Y cells are grown in 6 cm culture dishes in Dulbecco's Modified Medium (DMEM) containing 10% fetal bovine serum. For treatment, IO (5 μM), BIO (5 or 10 μM), MeBIO (5 or 50 μM), LiCl (20 or 40 mM), or mock solution (DMSO, 0.5% final concentration) is added to medium when cell density reaches ∼70% confluence. After 12 (SH-SY5Y) or 24 hours, the cells, while still in plate, are lysed with lysis buffer (1% SDS, 1 mM sodium orthovanadate, 10 mM Tris [pH 7.4]). The lysate is passed several times through a 26G needle, centrifuged at 10,000 × g for 5 min, and adjusted to equal protein concentration. About 8 μg of each sample is loaded for immunoblotting. Enhanced chemiluminescence is used for detection. The following primary antibodies are used: mouse anti-β-catenin CT (Upstate Biotechnolgies, Clone 7D8, recognizes total β-catenin), mouse anti-phospho-β-catenin (Upstate Biotechnologies, Clone 8E7, recognizes dephosphorylated β-catenin), mouse anti-GSK-3 β, mouse anti-GSK-3 phosphoTyr216, rabbit anti-AhR (Aryl hydrocarbon receptor), and rabbit anti-actin.
|
Исследование на животных: [4]
|
Animal Models
|
mouse
|
|
Formulation
|
freshly prepared in 30% Solutol (Basf) at a concentration of 10 mg/mL.
|
|
Dosages
|
50 mg/kg
|
|
Administration
|
Oral gavage
|
|
Solubility
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol,
30 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
356.17
|
|
Formula
|
C16H10BrN3O2
|
|
CAS No.
|
667463-62-9
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
GSK-3 Inhibitor IX, 6-bromoindirubin-3-oxime
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
71 mg/mL
(199.34 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
21 mg/mL
(58.96 mM)
|
|
In vivo
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
2H-Indol-2-one, 6-bromo-3-[(3E)-1,3-dihydro-3-(hydroxyimino)-2H-indol-2-ylidene]-1,3-dihydro-, (3Z)-
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : PI3K / Akt / mTOR > Ингибитор ГСК-3
