.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 665,66 PF-00562271 представляет собой бензолсульфонатную соль PF-562271, которая является мощным АТФ-конкурентным обратимым ингибитором FAK с IC50 1,5 нМ, ~ 10- в несколько раз менее эффективен для Pyk2, чем для FAK, и> 100-кратная селективность в отношении других протеинкиназ, за исключением некоторых CDK. Фаза 1. \ n Биологическая активность PF-562271 демонстрирует селективное ингибирующее действие на активность тирозинкиназ FAK и Pyk2 с IC50 1,5 и 14 нМ соответственно. И в анализах на основе клеток показано, что IC50 PF-562271 составляет 5 нМ для FAK, что является более селективным по сравнению с другими мишенями киназ. В 2-мерных (2D) культурах PF-562271 приводит к дозозависимому ингибированию пролиферации клеток в FAK WT, FAK - / - и FAK-киназа-дефицитных (KD) клетках с IC50 3,3 мкМ, 2,08 мкМ и 2,01 мкМ, соответственно. . В нескольких моделях подкожного трансплантата человека PF-562271 демонстрирует дозозависимое ингибирование роста опухоли и вызывает максимальное подавление опухоли для PC-3M, BT474, BxPc3 и LoVo в диапазоне от 78% до 94% ингибирования при дозах от 25 до 50 мг / кг. кг дважды в день, без потери веса, заболеваемости или смерти. PF-562271 (25 мг / кг перорально) приводит к значительному снижению прогрессирования опухоли в моделях ксенотрансплантата PC3M-luc-C6 как с подкожными, так и с костными метастазами. В модели ксенотрансплантата гепатоцеллюлярной карциномы Huh7.5 комбинированная терапия сунитинибом и PF-562271 нацелена на ангиогенез и агрессивность опухоли и дает более значительный противоопухолевый эффект, чем один агент, блокируя рост опухоли и влияя на способность опухоли восстанавливаться после отмены. терапии. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
Recombinant kinase assay and enzyme kinetics
|
Briefly, purified-activated FAK kinase domain (amino acid 410–689) is reacted with 50 μM ATP and 10 μg per well of a random peptide polymer of Glu and Tyr, p(Glu/Tyr), in kinase buffer [50 mM HEPES (pH 7.5), 125 mM NaCl, and 48 mM MgCl2] for 15 minutes. Phosphorylation of p(Glu/Tyr) is challenged with serially diluted PF-562271 at 1/2-Log concentrations starting at a top concentration of 1 μM. Each concentration is tested in triplicate. Phosphorylation of p(Glu/Tyr) is detected with a general antiphospho-tyrosine (PY20) antibody followed by horseradish peroxidase (HRP)-conjugated goat anti-mouse IgG antibody. HRP substrate is added, and absorbance readings at 450 nm are obtained after addition of stop solution (2 M H2SO4). IC50 values are determined using the Hill-Slope Model. Broad kinase selectivity profiling is performed in house and by using the KinaseProfiler Selectivity Screening Service available through UpState Biotechnology.
|
Клеточный анализ: [2]
|
Cell lines
|
Squamous cell carcinoma (SCC)
|
|
Concentrations
|
0 to 1 μM
|
|
Incubation Time
|
72 hours
|
|
Method
|
Cells are plated for 48 hours before addition of PF-562271. After 3 days cells are fixed by addition of ice cold 25% trichloroacetic acid (TCA) solution prior to staining with Sulforhodamine B (SRB) dye solution. Plates are washed with 1% glacial acetic acid, air-dried and resuspended in 10 mM Tris buffer, pH 10.5 before reading absorbance at 540 nm. Curve fitting and generation of IC50 values is carried out using GraphPad Prism 4 software from six replicates.
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
PC-3M, BT474, BxPc3, LoVo, U87MG, H125 and H460 cells are injected s.c. into the right flank of athymic female mice .
|
|
Formulation
|
PF-562271 is dissolved in 5% Gelucire.
|
|
Dosages
|
≤100 mg/kg
|
|
Administration
|
Administered via p.o.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
665.66
|
|
Formula
|
C21H20F3N7O3S.C6H6O3S
|
|
CAS No.
|
939791-38-5
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
PF-562271 Besylate
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
14 mg/mL
heating
(21.03 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
N-methyl-N-(3-((2-(2-oxoindolin-5-ylamino)-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-ylamino)methyl)pyridin-2-yl)methanesulfonamide benzenesulfonate
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Ангиогенез > ФАК ингибитор
