PHA-793887 718630-59-2

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 361,48 PHA-793887 - новый и мощный ингибитор CDK2, CDK5 и CDK7 с IC50 8 нМ, 5 нМ и 10 нМ. Он более чем в 6 раз более селективен в отношении CDK2, 5 и 7, чем CDK1, 4 и 9. Фаза 1. \ n Биологическая активность PHA-793887 имеет низкую активность в отношении CDK1, CDK4, CDK9 и GSK3β с IC50 60 нМ. , 62 нМ, 138 нМ и 79 нМ соответственно. PHA-793887 подавляет пролиферацию многих линий опухолевых клеток, включая A2780, HCT-116, COLO-205, C-433, DU-145, A375, PC3, MCF-7 и BX-PC3, с IC50 88 нМ– 3,4 мкМ. PHA-793887 (1 мкМ) показывает уменьшение фазы S, последующее увеличение фазы G1 и небольшое накопление фазы G2 / M в клетках A2780. PHA-793887 (3 мкМ) значительно увеличивает фазу G2 / M и снижает синтез ДНК. PHA-793887 цитотоксичен для линий лейкозных клеток, включая K562, KU812, KCL22 и TOM1, с IC50 0,3–7 мкМ, но он не цитотоксичен для нормальных нестимулированных мононуклеаров периферической крови или CD34 + гематопоэтических стволовых клеток. В анализах колоний PHA-793887 показывает очень высокую активность против линий лейкозных клеток с IC50 менее 0,1 мкМ. PHA-793887 индуцирует остановку клеточного цикла, ингибирует фосфорилирование Rb и нуклеофозмина, модулирует экспрессию циклина E и cdc6 при 0,2-1 мкМ и индуцирует апоптоз при 5 мкМ. PHA-793887 (10-30 мг / кг) демонстрирует хорошую эффективность на моделях ксенотрансплантата рака яичников человека A2780, HCT-116 толстой кишки и карциномы поджелудочной железы BX-PC3. PHA-793887 (20 мг / кг) эффективен в моделях ксенотрансплантатов клеток K562 и HL60, модели первичного диссеминированного лейкоза и модели диссеминированного ALL-2 с высоким бременем, полученной от рецидивирующего пациента с филадельфийским положительным острым лимфоидным лейкозом. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [3]

CDK Kinase Assay

The biochemical activity of compounds is determined by incubation with specific enzymes and substrates, followed by quantitation of the phosphorylated product. PHA-793887 (1.5 nM–10 μM) is incubated for 30−90 min at room temperature in the presence of ATP/33P-γ-ATP mix, substrate, and the specific enzyme (0.7−100 nM) in a final volume of 30 μL of kinase buffer, using 96 U bottom plates. After incubation, the reaction is stopped and the phosphorylated substrate is separated from nonincorporated radioactive ATP using SPA beads, Dowex resin, or Multiscreen phosphocellulose filter as follows: (1) For SPA Assays. The reaction is stopped by the addition of 100 μL of PBS + 32 mM EDTA + 0.1% Triton X-100 + 500 μM ATP, containing 1 mg of streptavidin-coated SPA beads. After 20 min of incubation for substrate capture, 100 μL of the reaction mixture is transferred into Optiplate 96-well plates containing 100 μL of 5 M CsCl, left to stand for 4 hours to allow stratification of beads to the top of the plate, and counted using TopCount to measure substrate-incorporated phosphate. (2) For Dowex Resin Assay. An amount of 150 μL of resin/formate, pH 3.00, is added to stop the reaction and capture unreacted 33P-γ-ATP, separating it from the phosphorylated substrate in solution. After 60 min of rest, 50 μL of supernatant is transferred to Optiplate 96-well plates. After the additon of 150 μL of Microscint 40, the radioactivity is counted in the TopCount. (3) For Multiscreen Assay. The reaction is stopped with the addition of 10 μL of EDTA (150 mM). An amount of 100 μL is transferred to a MultiScreen plate to allow substrate binding to phosphocellulose filter. Plates are then washed three times with 100 μL of H2PO4 (75 mM) filtered by a MultiScreen filtration system, and dried. After the additon of 100 μL of Microscint 0, radioactivity is counted in the TopCount. IC50 values are obtained by nonlinear regression analysis.

Клеточный анализ: [1]

Cell lines	A2780 cells
Concentrations	0.1 nM-1 μM, dissolved in DMSO
Incubation Time	72 hours
Method	Cells are seeded into 96- or 384-wells plates at final concentration ranging from 1 × 104 to 3 × 104 per cm2. After 24 hours, cells are treated using serial dilution of PHA-793887. At 72 hours after the treatment, the amount of cells are evaluated using the CellTiter-Glo assay. IC50 values are calculated using a sygmoidal fitt

Исследование на животных: [1]

Animal Models	Mouse xenograft models of human ovarian A2780, colon HCT-116 and pancreatic BX-PC3 carcinoma
Formulation	Dissolved in 5% dextrose solution
Dosages	10, 20, and 30 mg/kg
Administration	Intravenous injection once daily
Solubility	30% propylene glycol, 5% Tween 80, 65% D5W, 15 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Химическая информация

Molecular Weight (MW)	361.48
Formula	C19H31N5O2
CAS No.	718630-59-2

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	72 mg/mL (199.18 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	72 mg/mL (199.18 mM)
	In vivo	30% propylene glycol, 5% Tween 80, 65% D5W	15 mg/mL
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	N-(6,6-dimethyl-5-(1-methylpiperidine-4-carbonyl)-1,4,5,6-tetrahydropyrrolo[3,4-c]pyrazol-3-yl)-3-methylbutanamide

Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы

Группа Продуктов : Клеточный цикл > CDK ингибитор