.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 345,34 BMS-265246 - мощный и селективный ингибитор CDK1 / 2 с IC50 6 нМ / 9 нМ. Он в 25 раз более селективен в отношении CDK1 / 2, чем CDK4. \ N Биологическая активность BMS265246 подавляет активность CDK4 / cycD с IC50 0,23 мкМ и предотвращает A2780 Cytox с IC50 0,76 мкМ. BMS265246, который связывается с CDK2, показывает, что ингибитор находится в совпадении с сайтом связывания пурина АТФ и образует важные Н-связи с Leu83 на основе белка. BMS265246 проявляет активность CDK1 и CDK2, которая в 25 и 11 раз более эффективна по сравнению с CDK1 и CDK2, соответственно. BMS265246 представляет собой наиболее мощный селективный аналог CDK / CDK2 этого хемотипа. Недавнее исследование показывает, что BMS-265246 ингибирует пролиферацию клеток с EC50 в диапазоне от 0,293 мкМ до 0,492 мкМ в клетках HCT-116. После обработки BMS-265246 доминирующими популяциями клеток являются G2-арестованные клетки, имеющие содержание ДНК 4N, большие круглые ядра и низкую интенсивность ДНК. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
CDK1/Cyclin B1 Kinase Assay
|
Kinase reactions consists of 100 ng of baculovirus expressed GST-CDK1/cyclin B1 complex, 1 μg histone H1, 0.2 μCi 33P γ-ATP, 25 μM ATP in 50 μL of kinase buffer (50 mM Tris, pH 8.0, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 0.5 mM DTT). Reactions are incubated for 45 min at 30 °C and stopped by the addition of cold trichloroacetic acid (TCA) to a final concentration of 15%. TCA precipitates are collected onto GF/C unifilter plates using a Filtermate universal harvester, and the filters are quantitated using a TopCount 96 well liquid scintillation counter. Dose response curves are generated to determine the concentration required to inhibit 50% of kinase activity (IC50). BMS265246 is dissolved at 10 mM in DMSO and evaluated at six concentrations, each in triplicate. The final concentration of DMSO in the assay equals 2%. IC50 values are derived by nonlinear regression analysis and have a coefficient of variance (SD/mean, n = 6) = 16%.
|
|
CDK2/Cyclin E Kinase Assay
|
Kinase reactions consists of 5 ng of baculovirus expressed GST-CDK2/cyclin E complex, 0.5 μg GST-RB fusion protein (amino acids 776−928 of retinoblastoma protein), 0.2 μCi 33P γ-ATP, and 25 μM ATP in 50 μL of kinase buffer (50 mM HEPES, pH 8.0, 10 mM MgCl
|
Клеточный анализ: [2]
|
Cell lines
|
HCT116
|
|
Concentrations
|
0-5 μM
|
|
Incubation Time
|
24 hours
|
|
Method
|
HCT-116 cells are plated onto 96-well dishes. For each well, the cell density is calculated by counting the number of objects (cells) per field of view, and averaging across all fields for a given well. For a treatment compound, cell density is converted to a percentage relative to the plate-averaged cell density from DMSO treatment (i.e., 100% corresponds to the average cell density for DMSO treatment). Logistic regression curve fits are done using TIBCO Spotfire, and the concentration at which the curve crosses 50% is reported as the EC50 of BMS-265246.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
345.34
|
|
Formula
|
C18H17F2N3O2
|
|
CAS No.
|
582315-72-8
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
20 mg/mL
(57.91 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
In vivo
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
(4-butoxy-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl)(2,6-difluoro-4-methylphenyl)methanone
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Клеточный цикл > CDK ингибитор
