A-769662 844499-71-4

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 360,39 A-769662 - мощный обратимый активатор AMPK с EC50 0,8 мкМ, незначительно влияет на активность GPPase / FBPase. \ n A-769662 стимулирует частично очищенный AMPK печени крысы с помощью EC50 с 0,8 мкМ. A-769662 активирует AMPK, очищенный из различных тканей и видов, в зависимости от дозы с небольшими вариациями наблюдаемых EC50. EC50, определенные для A-769662 с использованием частично очищенных экстрактов AMPK из сердца, мышцы крысы или клеток эмбриональной почки человека (HEK), составляют 2,2 мМ, 1,9 мМ или 1,1 мМ, соответственно. Обработка первичных гепатоцитов крысы А-769662 в течение 4 часов дозозависимо увеличивает фосфорилирование АСС, что коррелирует ингибирование синтеза жирных кислот с IC50, равным 3,2 мкМ. A-769662 также ингибирует синтез жирных кислот в гепатоцитах мыши с IC50 с 3,6 мкМ [1] A-769662 активирует AMPK как аллостерически, так и путем ингибирования дефосфорилирования AMPK на Thr-172, подобно эффектам AMP. A-769662 подавляет функцию протеасомы с помощью AMPK-независимого механизма. A-769662 влияет на активность очищенных протеасом 26S in vitro, но не на активность очищенных протеасом 20S in vitro. A-769662 оказывает токсическое действие на клетки MEF. Недавнее исследование показывает, что A-769662 ингибирует пролиферацию клеток и синтез ДНК. Кратковременное лечение нормальных крыс Sprague Dawley A-769662 снижает уровни малонил-КоА в печени и коэффициент респираторного обмена, VCO2 / VO2, что указывает на повышенную скорость окисления жирных кислот в организме. Лечение мышей ob / ob 30 мг / кг 2 раза в день снижает экспрессию в печени PEPCK, G6Pase и FAS, снижает уровень глюкозы в плазме на 40%, снижает прирост массы тела и значительно снижает уровни триглицеридов как в плазме, так и в печени. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]

96-well AMPK assay

AMPK activity is measured by monitoring phosphorylation of the SAMS peptide substrate (20 mM in standard assays and 100 mM in additivity assays) following a previously described protocol (Anderson et al., 2004). To determine whether A-769662-induced AMPK activation occurs in a reversible manner, AMP or A-769662 are preincubated with rat liver AMPK for 10 minutes at 20 times standard assay concentrations prior to dilution and measurement of AMPK activity.

Fatty Acid Synthesis Assay

Primary rat hepatocytes are isolated and plated at 5 × 104 cells per well on BioCoat, collagen-coated, black-walled 96-well plates in DMEM supplemented with 10% FBS, 5 mM glucose, 1 mM sodium pyruvate, 2 mM L-glutamine, 25 mM HEPES, 0.1 m

Клеточный анализ: [3]

Cell lines	MEF cells
Concentrations	300 μM
Incubation Time	24 hours
Method	Cell viability of MEF cells treated or not with A-769662 is performed as follows: cells are harvested by trypsinization and incubated with 0.5 mg/mL RNase and 50 μg/mL propidium iodine at room temperature in the dark; cell viability is analyzed by flow cytometry using a FACScanto flow cytometer, using an excitation laser at 488 nm and a propidium iodine fluorescence detection at 600 nm. To determine the proportion of cells in each phase of the cell cycle, cells are harvested by trypsinization, collected by centrifugation, washed in PBS and fixed overnight in 80% ethanol at -20 °C. Subsequently, these fixed cells are centrifuged to remove the fixative and incubated for 20 minutes in the dark at room temperature in PBS containing 0.5 mg/mL RNase and 50 μg/mL propidium iodine. Flow cytometry analysis is performed as above. The proportion of cells in G1, S, and G2 is determined using the MODFIT program. Cell culture pictures are taken at the indicated times using a camera coupled to an inverted microscope with a 20 × objective.

Исследование на животных: [1]

Animal Models	Sprague Dawley rats
Formulation	A-769662 is dissolved in DMSO.
Dosages	30 mg/kg
Administration	Administered via i.p.
Solubility	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80, 30 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Химическая информация

Molecular Weight (MW)	360.39
Formula	C20H12N2O3S
CAS No.	844499-71-4

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	72 mg/mL (199.78 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	<1 mg/mL (
	In vivo	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80	30 mg/mL
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	Thieno[2,3-b]pyridine-5-carbonitrile, 6,7-dihydro-4-hydroxy-3-(2'-hydroxy[1,1'-biphenyl]-4-yl)-6-oxo-

Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы

Группа Продуктов : PI3K / Akt / mTOR > Ингибитор AMPK