PP2 172889-27-9

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 301,77 PP2, ингибитор киназы семейства Src, сильно ингибирует Lck / Fyn с IC50 4 нМ / 5 нМ, ~ в 100 раз менее активен для EGFR, неактивен для ZAP -70, JAK2 и PKA. \ N Биологическая активность PP2 ингибирует Src путем связывания с областью молекулы, которая не перекрывается с доменом связывания АТФ. PP2 (20 мкМ) вызывает 40-50% ингибирование роста клеток HT29, эта концентрация снижает активность Src уже на 1 час и поддерживает 35% ингибирование активности Src в течение 2 дней. PP2 (100 мМ) снижает активность Src клеток HT29 дозозависимым образом. PP2 (1 мМ-100 мМ) вызывает дозозависимое ингибирование роста клеток рака толстой кишки человека (HT29, SW480 и PMCO1), клеток рака печени (PLC / PRF / 5, KYN-2, Li7 и HepG2) и клетки рака молочной железы (MCF-7, MDA-MB-468 и BT-474). PP2 (20 мкМ) значительно увеличивает агрегацию в большинстве раковых клеток (HT29, SW480, PMCO1, PLC / PRF / 5, KYN-2, Li7, MCF-7 и MDA-MB-468) в зависимости от E-кадгерина. . PP2 (20 мкМ) усиливает экспрессию E-кадгерина, а также сильно увеличивает ассоциацию E-кадгерина с актиновым цитоскелетом в раковых клетках. PP2 (20 мкМ) увеличивает экспрессию α-катенина, β-катенина и γ-катенина в клетках HT29, тогда как в клетках PLC / PRF / 5 и MCF-7 общий уровень белка α-катенина не изменяется, но уровни β-катенина и γ-катенина немного повышаются. PP2 подавляет пролиферацию двух клеток рака шейки матки (HeLa и SiHa) в зависимости от времени и дозы. PP2 (10 мкМ) подавляет уровни экспрессии pSrc-Y416, pEGFR-Y845 и -Y1173 в клетках HeLa и SiHa. PP2 (10 мкМ) может модулировать остановку клеточного цикла за счет активации p21 (Cip1) и p27 (Kip1) в клетках HeLa и SiHa и подавления экспрессии циклина A и циклинзависимой киназы-2, -4 (Cdk- 2, -4) в HeLa и циклина B и Cdk-2 в SiHa. PP2 (5 мг / кг / день) вызывает некоторое замедление скорости роста первичных опухолей по сравнению с контролем, обработанным носителем, у мышей SCID, инокулированных клетками HT29 в селезенке. PP2 (5 мг / кг / день) вызывает некоторое замедление скорости роста первичных опухолей по сравнению с контролем, обработанным носителем, у мышей SCID, инокулированных клетками HT29 в селезенке. PP2 (5 мг / кг / день) значительно снижает относительный вес печени и объем метастазов в печень по сравнению с контролем на мышах SCID, инокулированных клетками HT29 в селезенке. Крысы, обработанные PP2 (1,5 мг / кг, внутрибрюшинно), показывают примерно 50% уменьшение размера инфаркта на Т2-взвешенной МРТ и при окрашивании ТТС по сравнению с контрольной группой у крыс с очаговым ишемическим повреждением головного мозга. PP2 (1,5 мг / кг внутрибрюшинно) дает лучший неврологический балл, чем контрольная группа, у крыс с очаговым ишемическим повреждением головного мозга. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]

Immune complex enzyme assays

The acid-treated enolase is diluted 1:20 with 1&times PBS before aliquoting 100 mL/well into a Nunc 96-well high protein binding assay plate. Assay wells are then aspirated; blocked with 0.5% bovine serum, 1&times PBS for 1 h at 37 ℃;and then washed five times with 300 mL of 1&times PBS/well. The source of Lck is either LSTRA cells or Lck expressed in HeLa cells using a vaccinia expression system. FynT is expressed in HeLa cells using the vaccinia system. Cells (12.5&times 106/mL) are lysed in lysis buffer (20 mM Tris, pH 8.0, 150 mM NaCl, 0.5% Nonidet P-40, and 23 trypsin inhibitory units/mL aprotinin), and the lysates are clarified by centrifugation at 14,000 cpm for 15 min at 4 ℃ in an Eppendorf tube. The clarified lysates are then incubated with the appropriate anti-kinase antibody at 10 μg/mL for 2 h at 4 ℃. Protein A-Sepharose beads are added to the antibody/lysate mixture at 250 μL/mL and allowed to incubate for 30 min at 4 ℃. The beads are then washed twice in 1 mL of lysis buffer and twice in 1 mL of kinase buffer (25 mM HEPES, 3 mM MnCl2, 5mM MgCl2, and 100 μM sodium orthovanadate) and resuspended to 50% (w/v) in kinase buffer. Twenty-five microliters of the bead suspension is added to each well of the enolase-coated 96-well high protein binding plate together with an appropriate concentration of compound and [γ-32P]ATP (25 μL/well of a 200 μCi/mL solution in kinase buffer). After incubation for 20 min at 20 ℃, 60 μLl of boiling 2&times solubilization buffer containing 10 mM ATP is added to the assay wells to terminate the reactions. Thirty microliters of the samples is removed from the wells, boiled for 5 min, and run on a 7.5% SDS-polyacrylamide gel. The gels are subsequently dried and exposed to Kodak X-AR film. For quantitation, films are scanned using a Molecular Dynamics laser scanner, and the optical density of the major substrate band, enolase p46, is determined. In companion experiments for measuring the activity of compounds against Lck, the assay plate is washed with two wash cycles on a Skatron harvester using 50 mM EDTA, 1 mM ATP. Scintillation fluid (100 μL) is then added to the wells, and 32P incorporation is measured using a micro-β-counter.

Клеточный анализ: [3]

Cell lines	HT29, SW480, PMCO1, PLC/PRF/5, KYN-2, Li7, HepG2, MCF-7, MDA-MB-468 and BT-474 cell lines
Concentrations	~100 μM
Incubation Time	2 days
Method	Cell viability is determined using an in vitro toxicology assay kit following the manufacturer`s instructions. Cells are seeded in 96-well plates at day 0. Starting at day 1, cells are treated for 2 days with each of a series of increasing concentrations of PP2 (1 μM, 10 μM, and 100 μM). At the end of this period, cell proliferation is evaluated by a colorimetric assay based on the cleavage of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide by mitochondria dehydrogenase in viable cells, leading to formazan formation. This experiment is repeated three times with 10 determinations/tested concentration.

Исследование на животных: [3]

Animal Models	SCID mice inoculated HT29 cells in the spleen
Formulation	1% DMSO
Dosages	5 mg/kg/day
Administration	intraperitoneal injection
Solubility	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80, 30 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Химическая информация

Molecular Weight (MW)	301.77
Formula	C15H16ClN5
CAS No.	172889-27-9

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms	AG 1879,AGL 1879

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	60 mg/mL (198.82 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	2 mg/mL (6.62 mM)
	In vivo	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80	30 mg/mL
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	1H-Pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine, 3-(4-chlorophenyl)-1-(1,1-dimethylethyl)-

Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы

Группа Продуктов : Ангиогенез > Ингибитор Src