.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 432,37 GSK429286A является селективным ингибитором ROCK1 и ROCK2 с IC50 14 нМ и 63 нМ соответственно. \ n Биологическая активность GSK429286A незначительно подавляет RSK и p70S6K с IC50 0,78 мкМ и 1,94 мкМ соответственно. GSK429286A значительно ингибирует дилатацию кольца аорты крысы с IC50 190 нМ. GSK429286A в концентрации 1 мкМ снижает активность ROCK2 более чем в 20 раз в условиях, в которых единственная протестированная киназа, которая значительно ингибируется, - это MSK1, активность которого снижена примерно в 5 раз. GSK429286A является более селективным ингибитором ROCK2, чем широко используемый ингибитор ROCK Y-27632, как оценивается на панели киназной специфичности, и не оказывает значительного ингибирования LRRK2 даже при дозах до 30 мкМ (в 500 раз выше, чем IC50 ингибирования ROCK2). . Подобно GSK269962A, но не сунитинибу, обработка GSK429286A в концентрации 10 мкМ устраняет базальное фосфорилирование или индуцированное мутантом G14V-Rho фосфорилирование MYPT по Thr850 в клетках HEK-293 в той же степени, что и H-1152 и Y-27632, что согласуется с ROCK, опосредующим это фосфорилирование, тогда как GSK429286A не ингибирует фосфорилирование белка ERM ни в присутствии, ни в отсутствие G14V-Rho. Биодоступность GSK429286A при пероральном приеме у самцов крыс Sprague-Dawley составляет 61%. Пероральное введение GSK429286A в разовых дозах 3-30 мг / кг резко снижает среднее артериальное давление у крыс со спонтанной гипертензией (SHR) в зависимости от дозы, с максимальным снижением на 50 мм рт. мг / кг. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
ROCK1 kinase assays
|
GSK429286A is dissolved at 10 mM in 100% DMSO, with subsequent serial dilution in 100% DMSO. ROCK1 inhibitor activity is determined using human recombinant His-tag ROCK1 kinase domain (amino acid 2-543) expressed in Sf9 cells. Assays of ROCK1 activity are performed in opaque, white walled, 384 well plates, in a total assay volume of 20 μL. The assays contain: 1 nM hROCK1; 1 μM biotinylated peptide (biotin-Ahx-AKRRRLSSLRA-CONH2); 1 μM ATP; 1.85 kBq per well ATP(γ-33P); 25 mM Hepes pH 7.4; 15 mM MgCl2; 0.015% BSA; increasing concentrations of GSK429286A ranging from 50 μM to 0.8 nM. The reactions are incubated at 22°C for 120 minutes, and then terminated by the addition of a 50 μL solution containing 60 mM EDTA and streptavidin PVT SPA beads. The SPA beads are added to a concentration of 0.14 mg per well. The plates are allowed to incubate at 22°C for 10 minutes before centrifugation at 1500 rpm for 1 minute. P33 incorporation is quantified by scintillation counting in a Packard TopCount. IC50 value is calculated by bespoke curve fitting software.
|
|
ROCK2 kinase assays
|
ROCK2 kinase assays are set up in a total volume of 40 μL with recombinant His6-ROCK2-(2-543) (80 ng, corresponding to 30 nM ROCK2 in the final kinase assay) in 50 mM Tris/HCl (pH 7.5), 0.1 mM EGTA, 10 mM MgCl2, 0.1 mM [γ-32P]ATP (~5
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
Male spontaneously hypertensive rats (SHRs)
|
|
Formulation
|
Formulated in 6% Hydroxypropyl-β-Cyclodextrin (pH4.0) and 5% DMSO solution
|
|
Dosages
|
~30 mg/kg
|
|
Administration
|
Oral gavage
|
|
Solubility
|
15% Captisol/citrate vehicle,
15 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
\ n Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
432.37
|
|
Formula
|
C21H16F4N4O2
|
|
CAS No.
|
864082-47-3
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
RHO-15
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
87 mg/mL
(201.21 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
4 mg/mL
(9.25 mM)
|
|
In vivo
|
15% Captisol/citrate vehicle
|
15 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
N-(6-fluoro-1H-indazol-5-yl)-2-methyl-6-oxo-4-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,4,5,6-tetrahydropyridine-3-carboxamide
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Клеточный цикл > Ингибитор РОК
