.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 517,46 CEP-32496 - мощный ингибитор BRAF (V600E / WT) и c-Raf с Kd 14 нМ / 36 нМ и 39 нМ, также способный Abl-1, c-Kit, Ret, PDGFRβ и VEGFR2 соответственно; незначительное сродство к МЕК-1, МЕК-2, ЭРК-1 и ЭРК-2. Фаза 1/2. \ N Биологическая активность CEP-32496 подавляет пролиферацию клеток A375 (BRAFV600E) с EC50 78 нМ. CEP-32496 проявляет более чувствительную цитотоксичность для линий опухолевых клеток (A375, SK-MEL-28, Colo-205, Colo-679 и HT-144), экспрессирующих мутантный BRAF, чем те, которые экспрессируют BRAF дикого типа (HCT116, Hs578T, LNCaP, ДУ145 и ПК-3). CEP-32496 ингибирует фосфорилирование митоген-активированного протеина (MAP) / регулируемой внеклеточными сигналами (ER) киназы (MEK) (pMEK) в клеточных линиях меланомы человека (A375) и колоректального рака (Colo-205) с IC50 78 нМ и 60 нМ. нМ соответственно. CEP-32496 проявляет хорошую стабильность в микросомальных препаратах печени мышей, собак, обезьян и человека с измеренными значениями внутреннего клиренса 1/2> 60 мин во всех анализах. CEP-32496 (30 мг / кг, перорально, BID) демонстрирует стаз опухоли и частичную регрессию опухоли (PR) на 40% в модели мыши с ксенотрансплантатом Colo-205, тогда как группа с дозой 100 мг / кг демонстрирует как стаз опухоли, так и частичную регрессию опухоли (PR). 80% случаев PR. CEP-32496 (30 мг / кг, перорально, BID) приводит к 50% и 75% ингибированию нормализованной pMEK в опухолевых лизатах через 2 часа и 6 часов после введения дозы, соответственно, в то время как доза 55 мг / кг приводит к ингибирование pMEK от 75% до 57% через 2 часа через 10 часов после введения в модели мыши с ксенотрансплантатом Colo-205. CEP-32496 является биодоступным при пероральном введении у нескольких доклинических видов (> 95% у крыс, собак и обезьян). CEP-32496 (100 мг / кг) приводит к ингибированию pMEK и pERK и устойчивому стазу опухоли и регрессии в ксенотрансплантатах карциномы толстой кишки BRAF (V600E) у мышей nude. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
Binding assay
|
Kinases are produced displayed on T7 phage or by expression in HEK-293 cells and tagged with DNA. Binding reactions are performed at room temperature for 1 hour, and the fraction of kinase not bound to test compound is determined by capture with an immobilized affinity ligand and quantitation by quantitative PCR. Each kinase is tested individually against CEP-32496. Kd values are determined using eleven serial 3-fold dilutions and presented as mean values from experiments performed in duplicate. Variability between individual values is less than 2-fold.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
A375 cell lines
|
|
Concentrations
|
78 nM
|
|
Incubation Time
|
72 hours
|
|
Method
|
Cells are seeded at 104 cells per well in DMEM with 10% fetal calf serum and allowed to attach. The cells are washed with PBS and switched to DMEM with 0.5% of serum and incubated overnight. CEP-32496 is then added at various concentrations with a final DMSO concentration of 0.5% and incubated for 72 h. At the end of incubation, a Cell Titer Blue is added per instructions, and incubation is continued for 3 hours. Remaining viable cells are quantified by measuring the strength of the fluorescence signal using SoftMax Pro (excitation at 560 nm and emission at 590 nm). IC50 values are derived using a 9-point curve fitted with Igor Pro and are presented as mean values from experiments performed in duplicate. Variability between individual values is less than 2-fold.
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
Colo-205 xenograft mouse model
|
|
Formulation
|
22% HPβCD
|
|
Dosages
|
100 mg/kg
|
|
Administration
|
oral gavage
|
|
Solubility
|
15% Captisol,
15 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
517.46
|
|
Formula
|
C24H22F3N5O5
|
|
CAS No.
|
1188910-76-0
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
9 mg/mL
(17.39 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
In vivo
|
15% Captisol
|
15 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
Urea, N-[3-[(6,7-dimethoxy-4-quinazolinyl)oxy]phenyl]-N-[5-(2,2,2-trifluoro-1,1-dimethylethyl)-3-isoxazolyl]-
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : MAPK > Раф ингибитор
