.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 618,81 Воласертиб (BI 6727) является сильнодействующим ингибитором Plk1 с IC50 0,87 нМ. Он показывает в 6 и 65 раз большую селективность против Plk2 и Plk3. Фаза 3. Биологическая активность. Подобно BI2536, BI6727 является АТФ-конкурентным ингибитором киназы из класса соединений дигидроптеридинонов. Помимо Plk1, BI6727 также эффективно ингибирует две близкородственные киназы Plk2 и Plk3 с IC50 5 нМ и 56 нМ соответственно. BI6727 в концентрациях до 10 мкМ не проявляет ингибирующей активности против панели из> 50 других киназ. BI6727 подавляет пролиферацию нескольких клеточных линий, полученных из различных раковых тканей, включая клетки HCT116, NCI-H460, BRO, GRANTA-519, HL-60, THP-1 и Raji с EC50 23 нМ, 21 нМ, 11 нМ, 15 нМ, 32 нМ, 36 нМ и 37 нМ соответственно. Обработка BI6727 (100 нМ) в клетках NCI-H460 индуцирует накопление митотических клеток с монополярными веретенами и положительное окрашивание на гистон H3 фосфосерин 10, подтверждая, что клетки задерживаются на ранней стадии М фазы с последующей индукцией апоптоза. Низкие наномолярные концентрации BI6727 проявляют сильную ингибирующую активность против нейробластомы (NB) опухолевых клеток (NB TIC) с EC50 21 нМ, тогда как только микромолярные концентрации BI6727 являются цитотоксичными для нормальных педиатрических нервных стволовых клеток. BI6727 вызывает остановку роста клеток медуллобластомы Daoy и ONS-76, аналогично BI 2536. Введение BI6727 значительно подавляет рост нескольких ксенотрансплантатов карциномы человека, включая HCT116, NCI-H460 и устойчивую к таксанам карциному толстой кишки CXB1, что сопровождается увеличением митотический индекс, а также увеличение апоптоза. В исследованиях in vivo BI6727 показывает лучшую токсичность и фармакокинетический профиль по сравнению с BI2536. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
In vitro kinase assays
|
Recombinant human Plk1 (residues 1-603) is expressed as NH2-terminal, GST-tagged fusion protein using a baculoviral expression system and purified by affinity chromatography using glutathione-agarose. Enzyme activity assays for Plk1 are done in the presence of serially diluted BI6727 using 20 ng of recombinant kinase and 10 μg casein from bovine milk as substrate. Kinase reactions are done in a final volume of 60 μL for 45 minutes at 30 °C [15 mM MgCl2, 25 mM MOPS (pH 7.0), 1 mM DTT, 1% DMSO, 7.5 μM ATP, 0.3 μCi γ-32P-ATP]. Reactions are terminated by the addition of 125 μL of ice-cold 5% TCA. After transferring the precipitates to MultiScreen mixed ester cellulose filter plates, plates are washed with 1% TCA and quantified radiometrically. Dose-response curves are used for calculating IC50 value.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
HCT116, NCI-H460, BRO, GRANTA-519, HL-60, THP-1, and Raji
|
|
Concentrations
|
Dissolved in DMSO, final concentrations ~1 μM
|
|
Incubation Time
|
24, 48, and 72 hours
|
|
Method
|
Cell proliferation assays are done by incubating cells in the presence of various concentrations of BI6727 for 24, 48, and 72 hours and cell growth is assessed by measuring Alamar blue dye conversion in a fluorescence spectrophotometer. Effective concentrations at which cellular growth is inhibited by 50% (EC50) are extrapolated from the dose-response curve fit. To determine the DNA content, cell suspensions are fixed in 80% ethanol, treated for 5 minutes with 0.25% Triton X-100 in PBS, and incubated with 0.1% RNase and 10 μg/mL propidium iodide in PBS for 20 minutes at room temperature. Cell cycle profiles are determined by flow cytometric analysis.
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
Female BomTac:NMRI-Foxn1nu mice grafted s.c. with HCT116, NCI-H460, or CXB1 cells
|
|
Formulation
|
Formulated in hydrochloric acid (0.1 N), and diluted with 0.9% NaCl, or suspended in 0.5% Natrosol 250 hydroxyethyl-cellulose
|
|
Dosages
|
~25 mg/kg/day
|
|
Administration
|
Injected i.v., or given intragastrally via gavage needle
|
|
Solubility
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol,
30 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
618.81
|
|
Formula
|
C34H50N8O3
|
|
CAS No.
|
755038-65-4
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
50 mg/mL
(80.8 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
124 mg/mL
(200.38 mM)
|
|
In vivo
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
N-((1r,4r)-4-(4-(cyclopropylmethyl)piperazin-1-yl)cyclohexyl)-4-((R)-7-ethyl-8-isopropyl-5-methyl-6-oxo-5,6,7,8-tetrahydropteridin-2-ylamino)-3-methoxybenzamide
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Клеточный цикл > Ингибитор PLK
