.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 460,45 OSU-03012 - мощный ингибитор рекомбинантного PDK-1 с IC50 5 мкМ и 2-кратным увеличением активности по сравнению с OSU-02067. \ n OSU-03012 вызывает апоптоз. гибель в клетках PC-3 с IC50 5 мкМ и снижает активность иммунопреципитированной p70S6K. OSU-03012 полностью подавляет рост клеток в разнообразных линиях опухолевых клеток при концентрациях 3-5 мкм по сравнению с концентрацией не менее 50 мкм, необходимой для целекоксиба. OSU-03012 способствует уничтожению клеток в большей степени в клетках глиомы, чем в нетрансформированных астроцитах. OSU-03012 вызывает дозозависимую индукцию гибели клеток, которая не изменяется мутацией p53, экспрессией ERBB1 VIII или потерей функции фосфатазы и тензина из-за делеции гомолога на хромосоме 10. OSU-03012 и ионизирующее излучение вызывают дополнительную , независимое от каспаз повышение гибели клеток. Летальность OSU-03012 как отдельного агента или в сочетании с модуляторами передачи сигналов не изменяется в клетках, в которых отсутствует экспрессия BIM или BAX / BAK. OSU-03012 способствует высвобождению катепсина B из лизосомального компартмента и AIF из митохондрий. Летальность OSU-03012 снижена в клетках киназы - / - протеинкиназы R эндоплазматического ретикулума, что коррелирует со сниженным расщеплением BID и подавлением высвобождения катепсина B и AIF в цитозоль. OSU-03012 подавляет пролиферацию, миграцию клеток рака щитовидной железы (клетки NPA, WRO и ARO) и индуцирует апоптоз, что приводит к увеличению количества клеток в S-фазе без увеличения количества клеток в G2. OSU-03012 является АТФ-конкурентным ингибитором активности PAK и подавляет фосфорилирование AKT в клетках рака щитовидной железы. OSU-03012 подавляет рост клеток линий гепатоцеллюлярной карциномы, включая клетки Huh7, Hep3B и HepG2, со значениями IC50 ниже 1 мкМ. OSU-03012 не подавляет активность PDK1 или AKT и не индуцирует клеточный апоптоз, но индуцирует аутофагию в клетках Huh7. Кроме того, после обработки OSU-03012 обнаруживается накопление активных форм кислорода (АФК). Недавнее исследование показывает, что OSU-03012 может повышать чувствительность мутантных клеточных линий (Bcr) -Abl к апоптозу, индуцированному иматинибом. \ n OSU-03012 подавляет рост опухоли на 57,59% и увеличивает расщепленный LC3 в ксенотрансплантатах опухоли Huh7 в дозе 200 мг / кг. OSU-03012 заметно снижает экспрессию белка EGFR в опухолях на 48% по сравнению с контрольными носителями, а также предотвращает связывание YB-1 с промотором EGFR в ксенотрансплантатах MDA-MB-435 / LCC6. OSU-03012 хорошо переносится и подавляет рост ксенотрансплантатов шванномы HMS-97 на 55% после перорального приема. \ n Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
PDK-1 Kinase Assay
|
This in vitro assay is performed using a PDK-1 kinase assay kit. This cell-free assay is based on the ability of recombinant PDK-1, in the presence of DMSO vehicle or OSU-03012, to activate its downstream serum- and glucocorticoid-regulated kinase which, in turn, phosphorylates the Akt/serum- and glucocorticoid-regulated kinase-specific peptide substrate RPRAATF with [γ-32P]ATP. The 32P-phosphorylated peptide substrate is then separated from the residual [γ-32P]-ATP by using P81 phosphocellulose paper and quantitated in a scintillation counter after three washes with 0.75% phosphoric acid.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
PC-3 cells
|
|
Concentrations
|
0-10 μM
|
|
Incubation Time
|
~72 hours
|
|
Method
|
The effect of OSU-03012 on PC-3 cell viability is assessed by using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide assay in six replicates. Cells are grown in 10% FBS- supplemented RPMI 1640 in 96-well, flat-bottomed plates for 24 hours. They are exposed to various concentrations of OSU-03012 (0-10 μM) dissolved in DMSO (final concentration ≤0.1%) in 1% serum-containing RPMI 1640 for different time intervals (~72 hours). Controls receive DMSO vehicle at a concentration equal to that in OSU-03012-treated cells. The medium is removed and replaced by 200 μL of 0.5 mg/mL 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide in 10% FBS-containing RPMI 1640. The cells are incubated in the CO2 incubator at 37 °C for 2 hours. Supernatants are removed from the wells, and the reduced 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide dye is solubilized in 200 μL DMSO per well. Absorbance at 570 nm is determined by using a plate reader.
|
Исследование на животных: [4]
|
Animal Models
|
Huh7 tumor xenografts in male BALB/c nude mice
|
|
Formulation
|
Dissolved in 0.5% methylcellulose, 0.1% Tween 80
|
|
Dosages
|
100-200 mg/kg
|
|
Administration
|
Daily by gavage
|
|
Solubility
|
0.5% methylcellulose/0.2% Tween 80,
30 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
460.45
|
|
Formula
|
C26H19F3N4O
|
|
CAS No.
|
742112-33-0
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
11 mg/mL
(23.88 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
In vivo
|
0.5% methylcellulose/0.2% Tween 80
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
2-amino-N-(4-(5-(phenanthren-2-yl)-3-(trifluoromethyl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)acetamide
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : PI3K / Akt / mTOR > Ингибитор ПДК-1
