ME0328 1445251-22-8

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 321,37 ME0328 - мощный и селективный ингибитор PARP с IC50 0,89 мкМ для PARP3, примерно 7-кратная селективность по сравнению с PARP1. \ n Биологическая активность ME0328 растворим, проницаем для клеток и метаболически стабильна в микросомах печени человека и гепатоцитах крысы. ME0328 (10 мкМ) приводит к значительной задержке разрешения γH2AX-фокусов за счет воздействия на ARTD3 в клетках A549 и MRC5 без значительной токсичности. Ферментативные анализы АДФ-рибозилирование белков измеряют с использованием белков ARTD, меченных гексагистидином, и рекомбинантных белков гистонов, захваченных на 96-луночных Ni2 + -хелатирующих планшетах (5-PRIME). Реакции ADP-рибозилирования инициируются добавлением NAD + (2% биотинилированного), а модифицированные продукты реакции обнаруживаются с помощью хемилюминесценции. Значения Km оцениваются с использованием графиков зависимости начальных скоростей от концентраций NAD + и построения линейной кривой с помощью GraphPad Prism. Все соединения растворяют в диметилсульфоксиде (ДМСО) до исходной концентрации 50 мМ. Эксперименты по определению значений IC50 проводят с концентрациями соединения в диапазоне от 10 нМ до 450 мкМ с концентрацией ДМСО 1% (об. / Об.). Измерения проводят при концентрации НАД + ниже Km для каждой трансферазы. Значения IC50 оцениваются с использованием аппроксимации кривой с помощью GraphPad Prism. Представленные значения представляют собой средние значения ± стандартная ошибка (SE) подгонок кривых, основанных на повторяющихся или трехкратных экспериментах, каждый из которых определяется на основе трех повторностей. Метод \ n Цитотоксичность соединения в клетках A549 и MRC5 оценивается с помощью анализов WST-1. Клетки A549 культивируют в среде Игла, модифицированной Дульбекко, с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки (FCS), пенициллина и стрептомицина. Клетки MRC5 культивируют в минимальной необходимой среде с добавлением 10% FCS, пенициллина, стрептомицина и l-глутамина. Обе клеточные линии хранятся в увлажненном инкубаторе при 37 ° C и 5% CO2. \ п

Группа Продуктов : Эпигенетика > Ингибитор PARP