Рефаметиниб (RDEA119, Bay 86-9766) 923032-37-5

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 572,34 Рефаметиниб (RDEA119, Bay 86-9766) является мощным неконкурентоспособным с АТФ и высокоселективным ингибитором MEK1 и MEK2 с IC50 19 нМ и 47 нМ, соответственно. \ n Биологическая активность RDEA119 селективно связывается непосредственно с аллостерическим карманом в ферментах MEK1 / 2 и очень эффективно ингибирует пролиферацию клеток в нескольких линиях опухолевых клеток, включая A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 и BxPC3. RDEA119 ингибирует зависящий от закрепления рост линий раковых клеток человека, несущих мутант V600E BRAF с усилением функции со значениями GI50 в диапазоне от 67 до 89 нМ. В условиях, не зависящих от закрепления, значения GI50 для всех тестируемых клеточных линий аналогичны (40-84 нМ). RDEA119 демонстрирует тканевую избирательность, которая снижает его потенциал для побочных эффектов, связанных с центральной нервной системой. RDEA119 сильно подавляет пролиферацию 4 клеточных линий, несущих мутацию BRAF, но не оказывает или оказывает незначительное влияние на другие 4 клетки, несущие BRAF дикого типа (IC50 0,034-0,217 мкМ против 1,413-34,120 мкМ). Этот ингибирующий эффект RDEA119 в выбранных клеточных линиях OCUT1 (BRAF V600E (+), PIK3CA H1047R (+)) и SW1376 (BRAF V600E (+)) усиливается за счет комбинации с ингибитором mTOR, темсиролимусом. RDEA119 и темсиролимус также проявляют синергетический эффект в отношении аутофагической гибели выборочно протестированных клеток OCUT1 и KAT18. Пероральное введение RDEA119 в дозе 50 мг / кг по схеме один раз в день × 14 приводит к 68% ингибированию роста опухоли (TGI) в модели опухоли меланомы человека A375. Пероральное введение RDEA119 в дозе 25 мг / кг по схеме один раз в день × 14 приводит к 123% TGI в модели опухоли карциномы толстой кишки человека Colo205 (TGI> 100% возникает, когда опухоль сокращается ниже своего начального объема). Доза 25 мг / кг один раз в день × 14 дает 56% и 67% TGI для опухолей HT-29 и A431 соответственно. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]

MEK Kinase Assay

Kinase inactive murine ERK2 (mERK2) K52A/T183A is affinity purified from Escherichia coli expressed using the pET21a vector. MEK1 kinase activity is determined using mERK2 K52A T183A as the substrate. Recombinant MEK1 enzyme (5 nM) is first activated by 0.02 unit or 1.5 nM of RAF1 in the presence of 25 mM HEPES (pH 7.8), 1 mM MgCl2, 50 mM NaCl, 0.2 mM EDTA, and 50 μM ATP for 30 minutes at 25 °C. The reactions are initiated by adding 2 μM of mERK2K52A T183A and 2.5 μCi [γ-33P] ATP in a total volume of 20 μL. The MEK2 kinase activity is determined similarly except that activation by RAF1 is not needed and 11 nM of MEK2 enzyme (active) are used in the assays.Kinase profiling is performed by Invitrogen using their Select Screen Kinase Profiling Service. The Z'-LYTE biochemical assay is used. RDEA119 is assayed in quadruplicate at 10 μM against 205 kinases.

Клеточный анализ: [1]

Cell lines	A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 and BxPC3 cells
Concentrations	10-1000 nM
Incubation Time	48 hours
Method	For anchorage-dependent growth inhibition experiments, cells are plated in white 384-well plates at 1,000/20 μL/well or white 96-well microplates at 4,000/100 μL/well. After 24-h incubation at 37 °C, 5% CO2, and 100% humidity, RDEA119 is incubated for 48 hours at 37 °C and assayed using CellTiter-Glo. For the 96-well anchorage-independent growth assay, wells of an [ultralow binding" plate (Corning) are filled with 60 μL of a 0.15% agarose solution in complete RPMI 1640. Then, 60 μL of complete RPMI 1640 containing 9,000 cells in 0.15% agarose are added per well. After 24 hour, 60 μL of a 3 × drug solution in agarose-free complete RPMI 1640 are added. After 7 d, 36 μL of 6 × 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)- 2H-tetrazolium, inner salt reagent are added per well. After 2 hours at 37 °C, absorbance at 490 nm is determined on the M5 plate reader.

Исследование на животных: [1]

Animal Models	Female athymic nude mice are injected s.c. with A375, HT-29 and A431 tumor; male athymic nude mice with Colo205 tumor.
Formulation	RDEA119 is dissolved in saline.
Dosages	25 or 50 mg/kg
Administration	Orally once daily for 14 days

Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Химическая информация

Molecular Weight (MW)	572.34
Formula	C19H20F3IN2O5S
CAS No.	923032-37-5

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms	BAY 869766

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	100 mg/mL (174.72 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	100 mg/mL (174.72 mM)
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	(S)-N-(3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-iodophenylamino)-6-methoxyphenyl)-1-(2,3-dihydroxypropyl)cyclopropane-1-sulfonamide

Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы

Группа Продуктов : MAPK > Ингибитор МЕК