IOX1 5852-78-8

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 189,17 IOX1 является мощным ингибитором широкого спектра действия 2OG-оксигеназ, включая деметилазы JmjC. \ n Биологическая активность IOX1 увеличивает уровни H3K9me3 в клетках HeLa посредством ингибирования KDM4A без значительного влияние на жизнеспособность клеток. IOX1 показывает более низкую эффективность в клетках HeLa из-за низкой проницаемости клеток, в то время как производное н-октилового эфира улучшает проницаемость клеток. Анализ AlphaScreen. Все реагенты разбавляют 50 мМ HEPES, 0,1% BSA, pH 7,5 с добавлением 0,01% Tween20 и дают возможность уравновеситься до комнатной температуры перед добавлением в планшеты. Анализы каталитического оборота проводят в объемах 10 мкл в 384-луночных планшетах с низким объемом при комнатной температуре. Реакция состояла из фермента (5 нМ), биотинилированного субстратного пептида (30 нМ), Fe (II) (1 мкМ), аскорбата (100 мкМ), 2OG (10 мкМ) и проводилась при комнатной температуре. Для PHD2 реакция состояла из фермента (5 нМ), биотинилированного пептида-субстрата (60 нМ), Fe (II) (20 мкМ), аскорбата (200 мкМ), 2OG (2 мкМ) и проводилась при комнатной температуре. ЭДТА используют для гашения реакции (5 мкл), добавляют донорные (конъюгированные со стрептавидином) и акцепторные (конъюгированные с белком А) гранулы AlphaScreen, предварительно инкубированные с антителами к пептидному продукту (5 мкл). Планшеты запечатывают фольгой для защиты от света, инкубируют при комнатной температуре в течение 60 минут и считывают на планшет-ридере PHERAstar FS с использованием набора фильтров возбуждения AlphaScreen 680 / эмиссии 570. Конечная концентрация гранул в реакционной смеси объемом 20 мкл составляет 20 мкг / мл. Значения IC50 рассчитываются в Prism 6 после нормализации относительно соответствующих контролей DMSO. Метод. Антипролиферативная активность соединений определяется методом МТТ. Клетки HeLa высевают в 96-луночные планшеты и культивируют при 37 ° C в течение 24 ч до достижения 70%. Затем среду заменяют средой DMEM, содержащей тестируемые соединения в различных концентрациях 1-300 мкМ в 1% ДМСО. Стауроспорин в конечной концентрации 0,03-10 мкМ используется в качестве контроля цитотоксичности. После 24 часов обработки среду заменяют реагентом с одним водным раствором CellTiter 96 и инкубируют в течение 4 часов. Значения CC50 рассчитывают в программном обеспечении Prism 6 после нормализации относительно соответствующих 1% обработанных ДМСО клеток и 1% ДМСО в контрольных средах (без клеток).

Группа Продуктов : Эпигенетика > Ингибитор гистоновой деметилазы