AC480 (BMS-599626) 714971-09-2

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 567.01 AC480 (BMS-599626) - селективный и эффективный ингибитор HER1 и HER2 с IC50 20 нМ и 30 нМ, что примерно в 8 раз менее эффективно по отношению к HER4, > 100 раз по сравнению с VEGFR2, c-Kit, Lck, MET и т. Д. Фаза 1. \ n Биологическая активность BMS-599626 также ингибирует родственный рецептор HER4, но со сниженной эффективностью с IC50 190 нМ. BMS-599626 идентифицирован как АТФ-конкурентный ингибитор для HER1 и как АТФ-неконкурентный ингибитор для HER2 с Ki 2 нМ и 5 нМ, соответственно. BMS-599626 подавляет пролиферацию опухолевых клеток, экспрессирующих высокие уровни HER1 и / или HER2, включая Sal2, BT474, N87, KPL-4, HCC202, HCC1954, HCC1419, AU565, ZR-75-30, MDA-MB-175, Клетки GEO и PC9 с IC50 0,24 мкМ, 0,31 мкМ, 0,45 мкМ, 0,38 мкМ, 0,94 мкМ, 0,34 мкМ, 0,75 мкМ, 0,63 мкМ, 0,51 мкМ, 0,84 мкМ, 0,90 мкМ и 0,34 мкМ соответственно. В то время как пролиферация линии клеток опухоли яичника A2780 и фибробластов MRC5, ни один из которых не экспрессирует HER1 или HER2, не ингибируется в значительной степени с помощью BMS-599626. Недавнее исследование показывает, что BMS-599626 значительно увеличивает радиочувствительность клеток HN-5, экспрессирующих как EGFR, так и Her2, за счет стимулирования перераспределения цикла и ингибирования репарации ДНК. In vivo пероральное введение BMS-599626 приводит к дозозависимому ингибированию роста опухоли Sal2 в дозах от 60 мг / кг до 240 мг / кг, обеспечивая мощную противоопухолевую активность в ксенотрансплантате опухоли молочной железы человека KPL-4. максимальная переносимая доза 180 мг / кг, а также имеет аналогичную противоопухолевую активность в других моделях ксенотрансплантатов, усиленных HER2, а также в других моделях ксенотрансплантатов с избыточной экспрессией HER1. \ n Анализы протеинкиназы. Полные цитоплазматические последовательности HER1, HER2 и HER4 экспрессируются в виде рекомбинантных белков в клетках насекомых Sf9. HER1 и HER4 экспрессируются в виде слитых белков с глутатион-S-трансферазой и очищаются с помощью аффинной хроматографии на глутатион-S-сефарозе. HER2 субклонируется в вектор pBlueBac4 и экспрессируется как немаркированный белок с использованием внутреннего кодона метионина (M687) для инициации трансляции. Усеченный белок HER2 выделяют хроматографией на колонке с DEAE-сефарозой, уравновешенной буфером, содержащим 0,1 М NaCl, и рекомбинантный белок элюируют буфером, содержащим 0,3 М NaCl. Для анализов киназы HER реакционные объемы составляют 50 мкл и содержат 10 нг слитого белка глутатион-S-трансферазы или 150 нг частично очищенного HER2. Смеси также содержат 1,5 мкМ поли (Glu / Tyr) (4: 1), 1 мкМ АТФ, 0,15 мкКи [γ-33P] АТФ, 50 мМ трис-HCl (pH 7,7), 2 мМ DTT, 0,1 мг / мл крупного рогатого скота. сывороточный альбумин и 10 мМ MnCl2. Реакциям дают возможность протекать при 27 ° C в течение 1 часа и останавливают добавлением 10 мкл стоп-буфера (2,5 мг / мл бычьего сывороточного альбумина и 0,3 М ЭДТА), а затем 108 мкл смеси 3,5 мМ АТФ. и 5% трихлоруксусной кислоты. Нерастворимые в кислоте белки собирают на планшетах GF / C Unifilter с помощью харвестера Filtermate. Включение радиоактивного фосфата в субстрат поли (Glu / Tyr) определяют с помощью жидкостного сцинтилляционного счета. Процент ингибирования активности киназы определяют с помощью нелинейного регрессионного анализа, и данные представляют как ингибирующую концентрацию, необходимую для достижения 50% ингибирования по сравнению с контрольными реакциями (IC50). Данные представляют собой средние значения трех определений. Все другие тирозинкиназы также анализируются с использованием поли (Glu / Tyr) в качестве субстрата. Кинетику ингибирования HER1 и HER2 определяют в реакционных смесях, содержащих различные концентрации АТФ и BMS-599626. \ n Метод. Все клеточные линии поддерживаются в среде RPMI 1640 с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки, 100 единиц / мл пенициллина и 100 мкг / мл стрептомицина. Клетки высевают по 1000 на лунку в 96-луночные планшеты и культивируют в течение 24 часов перед добавлением BMS-599626. BMS-599626 разводят в культуральной среде так, чтобы конечные концентрации ДМСО составляли ≤ 1%. После добавления BMS-599626 клетки культивируют в течение дополнительных 72 часов, прежде чем жизнеспособность клеток будет определена путем измерения превращения 3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолийбромидного красителя с Комплект CellTiter96. Для некоторых клеточных линий отсутствует корреляция между метаболизмом 3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолийбромидного красителя и числом клеток, и для измерения пролиферации эти клеточные линии. Клетки помещают в 96-луночные планшеты и обрабатывают соединениями, как указано выше. В конце 72-часовой инкубации клетки обрабатывают [3H] тимидином (0,4 мкКи / лунку) в течение 3 часов перед сбором. Клетки переваривают 2,5% трипсином в течение 10 минут при 37 ° C и собирают путем фильтрации с использованием Packard Filtermate Harvester и планшетов GF / C Unifilter. Включение радиоактивного тимидина в нуклеиновые кислоты определяют с помощью жидкостного сцинтилляционного счета.

Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор HER2