.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 547,96 TAK-285 - новый двойной ингибитор HER2 и EGFR (HER1) с IC50 17 нМ и 23 нМ,> 10-кратная селективность для HER1 / 2, чем для HER4 , менее эффективен к MEK1 / 5, c-Met, Aurora B, Lck, CSK и т. д. Фаза 1. \ n Биологическая активность Среди 34 протестированных киназ TAK-285 значительно ингибирует только HER4 с IC50 260 нМ, незначительно ингибирует MEK1, MEK5, c-Met, Aurora B, Lck, CSK и Lyn B с IC50 1,1 мкМ, 5,7 мкМ, 4,2 мкМ, 1,7 мкМ, 2,4 мкМ, 4,7 мкМ и 5,2 мкМ соответственно, и не проявляет активности против других киназ с IC50> 10 мкМ. TAK-285 проявляет значительную ингибирующую активность в отношении клеток BT-474 (линия клеток рака молочной железы человека, сверхэкспрессирующая HER2) с GI50 17 нМ. \ n По сравнению с SYR127063, мощным ингибитором HER2, TAK-285 проявляет аналогичную активность in vitro в отношении HER2 и EGFR. По сравнению с полными цитоплазматическими доменами белков дикого типа, мутации и укороченные границы, используемые для определения структуры HER2-KD и EGFR-KD, существенно не изменяют ингибирующую активность (IC50) TAK-285. TAK-285 связывается с неактивной конформацией EGFR и демонстрирует аналогичный способ связывания с лапатинибом в активном сайте. Пероральная биодоступность TAK-285 составляет 97,7% у крыс и 72,2% у мышей при дозе 50 мг / кг. Пероральное введение TAK-285 в дозе 100 мг / кг два раза в день в течение 14 дней демонстрирует значительную противоопухолевую эффективность на мышиной модели ксенотрансплантата опухоли BT-474 со сверхэкспрессией HER2 с соотношением опухоль / контроль (T / C) 29%, не влияя на массу тела. . Подобно модели BT-474, TAK-285 демонстрирует дозозависимое ингибирование роста опухоли ксенотрансплантатов 4-1ST (опухоль рака желудка человека, сверхэкспрессирующая HER2) у мышей с T / C 44% и 11% при дозах 50 мг. / кг и 100 мг / кг два раза в день, соответственно, без значительной потери массы тела у мышей. Кроме того, обработка TAK-285 вызывает дозозависимое ингибирование роста опухолей 4-1ST у крыс с T / C 38% и 14% при дозах 6,25 мг / кг и 12,5 мг / кг, и, что особенно важно, регресс опухоли с Т / К составляет -12% и -16% при дозах 25 мг / кг и 50 мг / кг соответственно. После перорального приема TAK-285 значительное количество TAK-285 присутствует в головном мозге крыс в фармакологически активной, несвязанной форме (примерно 20% от его свободного уровня в плазме), что указывает на то, что TAK-285 имеет потенциал в терапии. злокачественных новообразований / метастазов ЦНС. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
HER2 and EGFR kinase assay
|
The cytoplasmic domain (amino acids 676-1255) of human HER2 and the cytoplasmic domain (amino acids 669-1210) of human EGFR are expressed as N-terminal peptide (DYKDDDD)-tagged protein using a baculovirus expression system. The expressed HER2 kinase and EGFR kinase are purified by anti-FLAG M2 affinity gel. The EGFR and HER2 kinase assays are performed using radiolabeled [γ-32P]ATP in 96-well plates. The kinase reactions are performed in 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 5 mM MnCl2, 0.01% Tween 20, and 2 mM DTT containing 0.9 uCi of [γ-32P]ATP per reaction, 50 μM ATP, 5 ug/mL poly(Glu)-Tyr (4:1), and each purified cytoplasmic domain (0.25 μg/mL EGFR or HER2) in a total volume of 50 μL. To measure the IC50 value for enzyme inhibition, Increasing concentrations of TAK-285 are incubated with the enzyme for 5 minutes prior to the reaction at room temperature. The kinase reactions are initiated by adding ATP. After 10 minutes at room temperature, the reactions are stopped by the addition of 10% (final concentration) trichloroacetic acid. The γ-32P phosphorylated proteins are filtrated in a harvest plate with a cell harvester and washed free of [γ-32P]ATP with 3% phosphoric acid. The plates are dried followed by the addition of 25 μL of MicroScint0. The radioactivity is counted by a TopCount scintillation counter. IC50 values are calculated by nonlinear regression analysis of the percent inhibitions.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
BT-474
|
|
Concentrations
|
Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM
|
|
Incubation Time
|
5 days
|
|
Method
|
The cells are treated continuously with various concentrations of TAK-285 for 5 days. The live cell numbers are counted with a particle analyzer.
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
Female BALB/c nu/nu mice bearing BT-474 or 4-1ST xenografts, and female nude rats (F344/N Jcl-rnu) bearing 4-1ST xenografts
|
|
Formulation
|
Suspended in 0.5% (w/v) methylcellulose solution
|
|
Dosages
|
~100 mg/kg/day
|
|
Administration
|
Orally twice daily
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
547.96
|
|
Formula
|
C26H25ClF3N5O3
|
|
CAS No.
|
871026-44-7
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
110 mg/mL
(200.74 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
54 mg/mL
(98.54 mM)
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
N-(2-(4-(3-chloro-4-(3-(trifluoromethyl)phenoxy)phenylamino)-5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-5-yl)ethyl)-3-hydroxy-3-methylbutanamide
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор EGFR
