PF-04217903 956905-27-4

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 372,38 PF-04217903 - это селективный АТФ-конкурентный ингибитор c-Met с IC50 4,8 нМ, чувствительный к онкогенным мутациям (отсутствие активности по отношению к мутанту Y1230C). Фаза 1. \ n Биологическая активность Будучи более селективным, чем стауроспорин или PF-02341066, PF-04217903 демонстрирует> 1000-кратную селективность по c-Met по сравнению с панелью из 208 киназ, хотя более восприимчив к онкогенным мутациям c-Met, которые ослабляют активность. чем PF-02341066. В дополнение к c-Met дикого типа, PF-04217903 проявляет аналогичную способность ингибировать активность c-Met-H1094R, c-Met-R988C и c-Met-T1010I с IC50 3,1 нМ, 6,4 нМ и 6,7 нМ, соответственно, но не обладает ингибирующей активностью против c-Met-Y1230C с IC50> 10 мкМ. PF-04217903 в сочетании с сунитинибом значительно подавляет эндотелиальные клетки, но не опухолевые клетки B16F1, Tib6, EL4 и LLC. PF-04217903 значительно подавляет клоногенный рост LXFA 526L и LXFA 1647L со значениями IC50 16 нМ и 13 нМ, соответственно, давая аддитивный эффект в сочетании с цетуксимабом. PF-04217903 сильно подавляет процессы, управляемые c-Met, такие как рост, подвижность, инвазия и морфология различных опухолевых клеток. Обработка PF-04217903 (2 мкМ) увеличивала гибель клеток GTL-16, что включает подавление фосфорилированных 4E-BP1, белков, связанных с ERK / MAPK, и пути PI3K / AKT. Несмотря на то, что комбинация PF-04217903 и сунитиниба не может подавлять рост опухоли в моделях опухолей, чувствительных к сунитинибу B16F1 и Tib6, она значительно подавляет рост опухоли в моделях опухолей, устойчивых к сунитинибу EL4 и LLC, по сравнению с сунитинибом или только PF-04217903, значительно блокируя расширение сосудов, что указывает на функциональную роль оси HGF / c-Met в опухолях, устойчивых к сунитинибу. \ n Клеточное фосфорилирование c-Met Клетки ELISA A549 с эндогенным c-Met WT человека высевают в 96-луночные планшеты в среду для выращивания и культивируют в течение ночи. На второй день анализа питательную среду заменяют бессывороточной средой (с 0,04% BSA). В каждую лунку добавляют серийные разведения PF-04217903, и клетки инкубируют при 37 ° C в течение 1 часа. Затем к клеткам добавляют 40 нг / мл HGF на 20 минут. Клетки промывают один раз HBSS с добавлением 1 мМ Na3VO4, и белковые лизаты генерируются из клеток с использованием буфера для лизиса. Фосфорилирование c-Met оценивается методом ELISA с использованием захватывающих антител, специфичных для c-Met, и детектирующих антител, специфичных для фосфорилированных остатков тирозина. Покрытые антителами планшеты инкубируют в присутствии лизатов белков при 4 ° C в течение ночи и семь раз промывают 1% Tween 20 в PBS. HRP-PY20 (антифосфотирозин, конъюгированный с пероксидазой хрена) разбавляют 1: 500 в блокирующем буфере и добавляют в каждую чашку на 30 минут. Затем планшеты снова промывают, добавляют субстрат пероксидазы TMB для инициирования HRP-зависимой колориметрической реакции, и реакцию останавливают добавлением 0,09 н. H2SO4. Конечными точками ELISA являются оптическая плотность, измеренная при 450 нм с помощью спектрофотометра. Значение IC50 рассчитывается путем подбора кривой концентрация-ответ с использованием четырехпараметрического аналитического метода на основе Microsoft Excel.

Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор c-Met