Капматиниб (INCB28060) 1029712-80-8

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 412,42 Капматиниб (INCB28060) - новый АТФ-конкурентный ингибитор c-MET с IC50 0,13 нМ, неактивный против RONβ, а также EGFR и HER-3 . Фаза 1. \ n Биологическая активность. INCB28060 проявляет пикомолярную ферментативную активность и является высокоспецифичным для c-MET с более чем 10 000-кратной селективностью по сравнению с большой панелью киназ человека. INCB28060 ингибирует фосфорилирование c-MET человека и передачу сигналов c-MET в раковых клетках. INCB28060 ингибирует c-MET-зависимую пролиферацию и выживание клеток и предотвращает независимый от закрепления рост и миграцию раковых клеток. INCB28060 демонстрирует сильную противоопухолевую активность на моделях c-MET-зависимых опухолей у мышей, даже пероральное введение 0,03 мг / кг INCB28060 вызывает примерно 50% ингибирование c-MET-фосфорилирования. У мышей с опухолями наблюдается дозозависимое ингибирование роста опухоли. \ n Анализ c-Met киназы Буфер для анализа содержит 50 мМ Трис-HCl, 10 мМ MgCl2, 100 мМ NaCl, 0,1 мг / мл БСА, 5 мМ DTT, pH 7,8. Для HTS 0,8 мкл 5 мМ INCB28060, растворенного в ДМСО, нанесены на 384-луночные планшеты. Титрование ДМСО предполагает, что максимально допустимая концентрация растворителя составляет 4%. Для измерения IC50 планшет INCB28060 готовят с помощью 3-кратных и 11-точечных серийных разведений. 0,8 мкл INCB28060 в ДМСО переносят с планшета INCB28060 на планшет для анализа. Конечная концентрация ДМСО составляет 2%. Растворы 8 нМ нефосфорилированного c-Met или 0,5 нМ фосфорилированного c-Met готовят в буфере для анализа. 1 мМ исходный раствор пептидного субстрата биотин-EQEDEPEGDYFEWLE-амид, растворенный в ДМСО, разбавляют до 1 мкМ в буфере для анализа, содержащем 400 мкМ АТФ (нефосфорилированный c-Met) или 160 мкМ АТФ (фосфорилированный c-Met). 20 мкл раствора фермента (или аналитического буфера для бланка фермента) добавляют в соответствующие лунки каждого планшета, а затем 20 мкл / лунку раствора субстрата для инициирования реакции. Планшет защищают от света и инкубируют при 25 ° C в течение 90 минут. Реакцию останавливают добавлением 20 мкл раствора, содержащего 45 мМ EDTA, 50 мМ Tris-HCl, 50 мМ NaCl, 0,4 мг / мл BSA, 200 нМ SA-APC и 3 нМ EUPy20. Планшет инкубируют в течение 15-30 минут при комнатной температуре и измеряют HTRF (гомогенную флуоресценцию с временным разрешением) на приборе Perkin Elmer Fusion α-FP. Используемые настройки программы HTRF следующие: Фильтр первичного возбуждения 330/30, Первичное окно: 200 мкс, Первичная задержка: 50 мкс, Количество вспышек: 15, Время считывания: 2000 Ячейки метода H441 засеваются в среду RPMI-1640, содержащую 10% FBS и выросли до полного слияния. Зазоры вводятся путем соскабливания клеток наконечником пипетки P200. Затем клетки стимулируют рекомбинантным человеческим HGF с концентрацией 50 нг / мл, чтобы вызвать миграцию через разрыв в присутствии различных концентраций INCB28060. После инкубации в течение ночи делаются репрезентативные фотографии и проводится полуколичественная оценка ингибирования миграции клеток.

Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор c-Met