.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 418,37 GNF-5 - селективный и аллостерический ингибитор Bcr-Abl с IC50 220 нМ. \ n Биологическая активность GNF-5 при использовании в комбинации с иматинибом или нилотинибом подавляет появление мутаций устойчивости in vitro и проявляет дополнительную ингибирующую активность в биохимических и клеточных анализах против мутанта Bcr-Abl T315I. GNF-5 проявляет сильную антипролиферативную активность с EC50 430 нМ и 580 нМ против wt-Bcr-Abl и мутантных E255K клеток, трансформированных Bcr-Abl, соответственно. GNF-5 (100 мг / кг) демонстрирует эффективность в отношении Bcr-Abl-зависимой пролиферации дикого типа и T315I в моделях трансплантации ксенотрансплантата и костного мозга. Кроме того, комбинация GNF-5 (75 мг / кг) с нилотинибом (50 мг / кг) приводит к повышению общей выживаемости в модели T315I Bcr-Abl BMT. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
Kinetic characterization of Abl inhibition
|
The ATP/NADH-coupled assay system in a 96-well format is used to determine the initial velocity of Abl tyrosine kinase catalyzed peptide phosphorylation. The reaction mixture contained 20 mM Tris-HCl, (pH 8.0), 50 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 2 mM PEP [2-(Phosphonooxy)- 2-propenoic acid) and 20 μg Abl peptide substrate (EAIYAAPFAKKK), fixed or varied (to determine inhibitor kinetic parameters) concentration of inhibitor applied, 1/50 of the final reaction mixture volume of PK/LDH enzyme (pyruvate kinase/lactic dehydrogenase enzymes from rabbit muscle), 160 μM NADH, 0.16 μM Abl, and ATP added last to start the reaction. Absorbance data are collected every 20s at 340 nm using a SpectraMax M5 Microplate Reader.
|
Клеточный анализ: [2]
|
Cell lines
|
Ba/F3.p210 cells
|
|
Concentrations
|
~10 μM
|
|
Incubation Time
|
48 hours
|
|
Method
|
Ba/F3.p210 cells are obtained by transfecting the IL-3-dependent murine hematopoietic Ba/F3 cell line with a pEYK vector containing p210BCR-ABL and Bcr-Abl mutations. All cell lines are cultured with 5% CO2 at 37 °C in RPMI 1640 with 10% fetal bovine serum (FBS) and supplemented with 1% l-glutamine. Parental Ba/F3 cells are similarly cultured with 10% WEHI-conditioned medium as a source of IL-3. Transfected cell lines are cultured in media supplemented with 25 μg/mL zeocin. The 48 h cell proliferation studies are obtained using the CellTiter-Glo assay.
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
Ba/F3.p210 xenograft mouse model
|
|
Formulation
|
PEG400/saline, 1:1
|
|
Dosages
|
~100 mg/kg bid
|
|
Administration
|
p.o.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
\ n Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
418.37
|
|
Formula
|
C20H17F3N4O3
|
|
CAS No.
|
778277-15-9
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
N/A
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
83 mg/mL
(198.38 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
20 mg/mL
heating
(47.8 mM)
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
N-(2-Hydroxyethyl)-3-[6-[[4-(trifluoromethoxy)phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]benzamide
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Ангиогенез > Bcr-Abl ингибитор
