.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 473,98 Пазопаниб (GW786034) - новый многоцелевой ингибитор VEGFR1, VEGFR2, VEGFR3, PDGFR, FGFR, c-Kit и c-Fms с IC50 10 нМ. , 30 нМ, 47 нМ, 84 нМ, 74 нМ, 140 нМ и 146 нМ соответственно. \ N Биологическая активность Пазопаниб сильно ингибирует VEGF-индуцированное фосфорилирование VEGFR2 в клетках HUVEC с IC50 8 нМ. Пазопаниб демонстрирует дозозависимое ингибирование роста во всех линиях клеток синовиальной саркомы, включая клетки SYO-1 и HS-SY-II. Пролиферация клеток SYO-1 и HS-SY-II подавляется даже при 1 мкг / мл пазопаниба и полностью исчезает при 5 мкг / мл. Пазопаниб вызывает остановку G1 и тем самым подавляет рост клеток синовиальной саркомы. Фосфорилирование Akts, GSK-3β, JNK, p70 S6-киназы и mTOR подавляется в обработанных пазопанибом клетках SYO-1 по сравнению с таковым в клетках, обработанных носителем. Пазопаниб в диапазоне от 20 мг / мл до 22,5 мг / мл показывает возрастающее снижение жизнеспособности клеток RPE. У мышей, получавших 30 мг / кг или 100 мг / кг пазопаниба, обнаруживается значительное снижение опухолевой нагрузки по сравнению с мышами, получавшими носитель или 10 мг / кг пазопаниба. Лечение пазопанибом хорошо переносится, и нет значительных различий в массе тела мышей в каждой группе. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
Kinase enzyme assays
|
VEGFR enzyme assays for VEGGR1, VEGFR2, and VEGFR3 are run in homogeneous time-resolved fluorescence (HTRF) format in 384-well microtiter plates using a purified, baculovirus-expressed glutathione-S-transferase (GST) fusion protein encoding the catalytic c-terminus of human VEGFR receptor kinases 1, 2, or 3. Reactions are initiated by the addition of 10 μL of activated VEGFR2 kinase solution [final concentration, 1 nM enzyme in 0.1 M HEPES, pH 7.5, containing 0.1 mg/mL bovine serum albumin (BSA), 300 μM dithiothreitol (DTT)] to 10 μL substrate solution [final concentration, 360 nM peptide, (biotin-aminohexyl-EEEEYFELVAKKKK-NH2), 75 μM ATP, 10 μM MgCl2], and 1 μL of titrated Pazopanib in DMSO. Plates are incubated at room temperature for 60 min, and then the reaction is quenched by the addition of 20 μL of 100 mM ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA). After quenching, 20 μL HTRF reagents (final concentration, 15 nM Streptavidin-linked allophycocyanin, 1 nM Europium-labeled antiphosphotyrosine antibody diluted in 0.1 mg/mL BSA, 0.1 M HEPES, pH 7.5) is added and the plates incubated for a minimum of 10 min. The fluorescence at 665 nM is measured with a Wallac Victor plate reader using a time delay of 50 μs.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
HUVEC cells
|
|
Concentrations
|
0-10 μM
|
|
Incubation Time
|
1 hour
|
|
Method
|
Phosphorylation of VEGFR2 is assessed in HUVEC stimulated with VEGF. HUVEC are plated in type-I collagen-coated 10 cm plates in Clonetics EGM-MV medium at 1.0-1.5 × 106 cells/plate. After 24 hours, the confluent cells are serum starved overnight by replacing the growth medium with Clonetics EBM medium containing 0.1% BSA, 500 μg/mL hydrocortisone. Cells are treated with Pazopanib at various concentrations for 1 hour, followed by addition of 10 ng/mL VEGF or vehicle for 10 min. Cells are solubilized in lysis buffer. VEGFR2 is immunoprecipitated using antiflk-1 antibody and analyzed by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) followed by Western blotting and detection with antiflk-1 or with antiphosphotyrosine (anti-P-tyr-biotin) antibody. The VEGFR2 phosphorylation level is quantified by densitometry and normalized to the total VEGFR2 level.
|
Исследование на животных: [2]
|
Animal Models
|
Immunodeficient mice bearing SYO-1 cells
|
|
Formulation
|
|
|
Dosages
|
0 mg/kg, 10 mg/kg, 30 mg/kg, or 100 mg/kg
|
|
Administration
|
Oral administration
|
|
Solubility
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol,
30 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
473.98
|
|
Formula
|
C21H23N7O2S.HCl
|
|
CAS No.
|
635702-64-6
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
17 mg/mL
(35.86 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
In vivo
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
5-(4-((2,3-dimethyl-2H-indazol-6-yl)(methyl)amino)pyrimidin-2-ylamino)-2-methylbenzenesulfonamide hydrochloride
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Ангиогенез > Bcr-Abl ингибитор
