.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 374,32 GNF-2 - высокоселективный не-АТФ конкурентный ингибитор Bcr-Abl, не проявляет активности к Flt3-ITD, Tel-PDGFR, TPR-MET и Tel. -JAK1 трансформированные опухолевые клетки. \ N Биологическая активность GNF-2 вызывает дозозависимое ингибирование роста Bcr-abl-положительных клеточных линий со значениями IC50 273 нМ (K562) и 268 нМ (SUP-B15). GNF-2 подавляет рост клеток Ba / F3.p210E255V и Ba / F3.p185Y253H со значениями IC50 268 и 194 нМ соответственно. GNF-2 (1 мкМ) индуцирует апоптоз клеток Ba / F3.p210, а также клеток Ba / F3.p210E255V. GNF-2 ингибирует клеточное фосфорилирование тирозина Bcr-abl дозозависимым образом с IC50 267 нМ. GNF-2 (1 мкМ) вызывает значительное снижение уровней фосфо-Stat5 в клетках Ba / F3.p210. GNF-2 связывается с миристическим связывающим карманом Bcr-abl. GNF-2 ингибирует киназную активность немиристоилированного c-Abl более эффективно, чем миристоилированного c-Abl, за счет связывания с миристат-связывающим карманом в C-доле киназного домена. GNF-2 (10 мкМ) требует доменов BCR и / или c-Abl SH3 и / или SH2 для ингибирования BCR-Abl-зависимой пролиферации клеток. GNF-2, но не метилированный аналог GNF-2, связывает c-Abl в клеточных экстрактах, полученных из фибробластов 3T3. GNF-2 (10 мкМ) в зависимости от дозы явно ингибирует фосфорилирование тирозина CrkII. GNF-2 ингибирует фосфорилирование CrkII в клетках, экспрессирующих c-AblG2A, с IC50 0,051 мкМ. GNF-2 связывается в расширенной конформации в миристатном кармане с CF3-группой, захороненной на той же глубине, что и последние два атома углерода миристатного лиганда. GNF-2 (10 мкМ) в сочетании с иматинибом (1 мкМ) снижает количество устойчивых клонов до 1 мкМ иматиниба как минимум на 90%. GNF-2 ингибирует аутофосфорилирование и пролиферацию клеток BafF3, экспрессирующих мутанты p210Bcr – Abl и p210Bcr – Abl. GNF-2 (8 нМ) в сочетании с GNF-5 (20 нМ) приводит к аддитивным эффектам в отношении ингибирования активности киназы Abl64-515. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [2]
|
Binding assay
|
Recombinant proteins (100 nM for each construct) or immunoprecipitated proteins are diluted in kinase buffer (20 mM HEPES (pH 7.4), 50 mM KCl, 0.1% CHAPS, 30 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 1 mM DTT, and 1% glycerol). Aliquots of the diluted proteins are preincubated with either DMSO or compounds for 30 min at room temperature and then added to K-LISA PTK EAY reaction plates. The kinase reaction is initiated by adding 0.1 mM ATP and is allowed to proceed for 30 min at room temperature. The phosphorylation of GST-Abltide is monitored by SDS-PAGE and phosphorimaging analysis or autoradiography.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
Ba/F3.p210, Ba/F3.p210E255V and Ba/F3.p185Y253H cells
|
|
Concentrations
|
~10 μM
|
|
Incubation Time
|
48 hours
|
|
Method
|
Cells (0.3-0.6 × 106 per mL) are plated in duplicate or triplicate in 96-well plates containing increasing GNF-2 concentrations (5 nM–10 μM). After incubation at 37 ℃ in 5% CO2 for 48 hours, the effect of GNF-2 on cell viability is determined by the MTT colorimetric dye reduction method. Inhibition of cell proliferation is calculated as a percentage of growth of DMSO-treated cells, and IC50 values are determined with Microsoft Excel XLfit3.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
374.32
|
|
Formula
|
C18H13F3N4O2
|
|
CAS No.
|
778270-11-4
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
74 mg/mL
(197.69 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
Benzamide, 3-[6-[[4-(trifluoromethoxy)phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]-
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Ангиогенез > Bcr-Abl ингибитор
