CYC116 693228-63-6

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 368,46 CYC116 - мощный ингибитор Aurora A / B с Ki 8,0 нМ / 9,2 нМ, менее эффективен по отношению к VEGFR2 (Ki 44 нМ), с 50- эффективность в несколько раз выше, чем у CDK, не активна против PKA, Akt / PKB, PKC, не влияет на GSK-3α / β, CK2, Plk1 и SAPK2A. Фаза 1. \ n Биологическая активность. Наиболее избирательный к Aurora CYC116 проявляет ингибирующее действие на киназы Aurora A и B в 50 раз сильнее, чем любой из исследованных CDK. Первоначально CYC116 подвергается скринингу против панели клеточных линий лейкемии человека и солидных опухолей с использованием антипролиферативного анализа МТТ. Результаты показывают, что CYC116 обладает противоопухолевой активностью широкого спектра и проявляет специфическую цитотоксичность в отношении линии клеток острого миелогенного лейкоза MV4-11 с IC50 34 нМ. Кроме того, обнаружено, что антипролиферативная активность CYC116 связана с модуляцией Aurora A и B, такой как ингибирование аутофосфорилирования Aurora, снижение фосфорилирования гистона H3, полиплоидия с последующей гибелью клеток в результате нарушения цитокинеза. Мышам, несущим подкожные ксенотрансплантаты NCI-H460, вводят CYC116 перорально в течение 5 дней при уровнях доз 75 и 100 мг / кг ежедневно. Это приводит к задержке роста опухоли на 2,3 и 5,8 дня, что выражается в специфической задержке роста 0,32 и 0,81 соответственно. . \ n Анализы киназы Анализы киназы Aurora A выполняются с использованием реакционного объема 25 мкл (25 мМ β-глицерофосфат, 20 мМ Tris / HCl, pH 7,5, 5 мМ EGTA, 1 мМ DTT, 1 мМ Na3VO4, 10 мкг кемптида (пептид подложка)). Рекомбинантная киназа Aurora A разводится в 20 мМ Tris / HCl, pH 8, содержащем 0,5 мг / мл BSA, 2,5% глицерина и 0,006% Brij-35. Реакции начинают добавлением 5 мкл смеси Mg / ATP (15 мМ MgCl2, 100 мкМ АТФ, с 18,5 кБк γ-32P-ATP на лунку) и инкубируют при 30 ° C в течение 30 минут перед завершением с 25 мкл 75 мМ. H3PO4. Анализы киназы Aurora B выполняются так же, как Aurora A, за исключением того, что перед использованием Aurora B активируется в отдельной реакции при 30 ° C в течение 60 минут с внутренним белком центромеры. Метод \ n Выполняются стандартные анализы МТТ. Короче говоря, клетки высевают в 96-луночные планшеты в соответствии со временем удвоения и инкубируют в течение ночи при 37 ° C. Тестируемые соединения готовят в ДМСО, готовят серию трехкратных разведений в 100 мкл клеточной среды, добавляют к клеткам (в трех повторностях) и инкубируют в течение 72 или 96 часов при 37 ° C. МТТ готовят в виде запаса 5 мг / мл в клеточной среде, и раствор стерилизуют фильтрованием. Среду удаляют из клеток с последующей промывкой PBS. Затем добавляют раствор МТТ в количестве 20 мкл / лунку и инкубируют в темноте при 37 ° C в течение 4 часов. Раствор МТТ удаляют, и клетки снова промывают 200 мкл PBS. Краситель МТТ солюбилизируют 200 мкл / лунку ДМСО при перемешивании. Поглощение считывают при 540 нм и данные анализируют с использованием программного обеспечения для построения кривой для определения значений IC50. \ п

Группа Продуктов : Эпигенетика > Ингибитор аврора-киназы