.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 513,59 ZM 447439 является селективным и АТФ-конкурентным ингибитором Aurora A и Aurora B с IC50 110 нМ и 130 нМ, соответственно. Он более чем в 8 раз селективен к Aurora A / B, чем MEK1, Src, Lck, и имеет слабый эффект против CDK1 / 2/4, Plk1, Chk1 и т. Д. \ N Биологическая активность In vitro ZM-447439 селективно ингибирует рекомбинантный человеческий Aurora A и B со значениями IC50 110 и 130 нМ соответственно, тогда как другие протеинкиназы различных структурных типов, включая митотические киназы CDK1 и PLK1, ингибируются со значениями IC50> 10 мкМ. Ингибитор киназы Aurora, ZM-447439, в зависимости от времени и дозы ингибирует рост всех трех клеточных линий со значениями IC50 3 мкМ (BON), 0,9 мкМ (QGP-1) и 3 мкМ (MIP-101) через 72 часа после приема. непрерывное воздействие. Кроме того, ZM-447439 сильно индуцирует апоптоз клеток, способствуя фрагментации ДНК и активации каспаз 3 и 7, и останавливает клетки GEP-NET в фазах G0 / G1 и G2 / M клеточного цикла. У эмбрионов мыши ингибирование активности киназы Aurora с помощью ZM-447439 приводит к аномалиям во время митоза за счет регулирования фосфорилирования гистона H3 серина 10 (H3S10Ph) из G2 в метафазу с различными нарушениями в каждом эмбриональном цикле. Недавнее исследование показывает, что ZM-447439 проявляет ингибирующий рост и проапоптотический эффект на клетки SiHa рака шейки матки и повышает химиочувствительность к цисплатину.
|
In vitro kinase assays
|
Recombinant Aurora A and B are expressed as NH2-terminal His6-tagged fusion proteins using a baculovirus expression system. Aurora A is purified by affinity chromatography using Ni-NTA agarose, and Aurora B is purified by ion exchange chromatography using CM Sepharose Fast Flow. 1 ng purified recombinant enzyme is added to a reaction cocktail containing 25 mM Tris-HCl, pH 7.5, 12.5 mM KCl, 2.5 mM NaF, 0.6 mM DTT, 6.25 mM MnCl2, 10 μM peptide substrate, 10 μM for Aurora A or 5 μM ATP for Aurora B, and 0.2 μCi γ-[33P]ATP (specific activity ≥2,500 Ci/mmol), and is then incubated at RT for 60 minutes. Reactions are stopped by addition of 20% phosphoric acid, and the products are captured on P30 nitrocellulose filters and assayed for incorporation of 33P with a BetaplateTM counter. No enzyme and no compound control values are used to determine the concentration of ZM447439, which gave 50% inhibition of enzyme activity. Further details are available on request from Nicholas Keen.
|
|
Cell lines
|
BON, QGP-1 and MIP-101 cells
|
|
Concentrations
|
0-5 μM
|
|
Incubation Time
|
72 hours
|
|
Method
|
Cell number is evaluated by crystal violet staining. In brief, cells in 96-well plates are fixed with 1% glutaraldehyde. Then cells are stained with 0.1% crystal violet. The unbound dye is removed by washing with water. Bound crystal violet is solubilized with 0.2% Triton X-100. Light extinction which increases linearly with the cell number is analyzed at 570 nm using an ELISA reader.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
513.59
|
|
Formula
|
C29H31N5O4
|
|
CAS No.
|
331771-20-1
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
103 mg/mL
(200.54 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
In vivo
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
N-(4-(6-methoxy-7-(3-morpholinopropoxy)quinazolin-4-ylamino)phenyl)benzamide
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Эпигенетика > Ингибитор аврора-киназы
