ЗМ 447439 331771-20-1

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 513,59 ZM 447439 - селективный и АТФ-конкурентный ингибитор Aurora A и Aurora B с IC50 110 нМ и 130 нМ соответственно. Он более чем в 8 раз селективен к Aurora A / B, чем MEK1, Src, Lck, и имеет слабый эффект против CDK1 / 2/4, Plk1, Chk1 и т. Д. \ N Биологическая активность In vitro ZM-447439 селективно ингибирует рекомбинантный человеческий Aurora A и B со значениями IC50 110 и 130 нМ соответственно, тогда как другие протеинкиназы различных структурных типов, включая митотические киназы CDK1 и PLK1, ингибируются со значениями IC50> 10 мкМ. Ингибитор киназы Aurora, ZM-447439 в зависимости от времени и дозы ингибирует рост всех трех клеточных линий со значениями IC50 3 мкМ (BON), 0,9 мкМ (QGP-1) и 3 мкМ (MIP-101) после 72 часов приема. непрерывное воздействие. Кроме того, ZM-447439 сильно индуцирует апоптоз клеток, способствуя фрагментации ДНК и активации каспаз 3 и 7, и останавливает клетки GEP-NET в фазах G0 / G1 и G2 / M клеточного цикла. У эмбрионов мыши ингибирование активности киназы Aurora с помощью ZM-447439 приводит к аномалиям во время митоза за счет регулирования фосфорилирования гистона H3 серина 10 (H3S10Ph) из G2 в метафазу с различными нарушениями в каждом эмбриональном цикле. Недавнее исследование показывает, что ZM-447439 проявляет ингибирующий рост и проапоптотический эффект на клетки SiHa рака шейки матки и повышает химиочувствительность к цисплатину. \ n Анализы киназы in vitro. Рекомбинантные Aurora A и B экспрессируются как слитые белки, меченные NH2-концом His6, с использованием системы экспрессии бакуловируса. Aurora A очищают с помощью аффинной хроматографии с использованием Ni-NTA агарозы, а Aurora B очищают с помощью ионообменной хроматографии с использованием CM Sepharose Fast Flow. 1 нг очищенного рекомбинантного фермента добавляют к реакционной смеси, содержащей 25 мМ Трис-HCl, pH 7,5, 12,5 мМ KCl, 2,5 мМ NaF, 0,6 мМ DTT, 6,25 мМ MnCl2, 10 мкМ пептидного субстрата, 10 мкМ для Aurora A или 5 мкМ. АТФ для Aurora B и 0,2 мкКи γ- [33P] АТФ (удельная активность ≥2 500 Ки / ммоль), а затем инкубируют при комнатной температуре в течение 60 минут. Реакции останавливаются добавлением 20% фосфорной кислоты, и продукты улавливаются нитроцеллюлозными фильтрами P30 и анализируются на включение 33P с помощью счетчика BetaplateTM. Для определения концентрации ZM447439, которая давала 50% ингибирование активности фермента, не использовали ни фермент, ни контрольные значения соединения. Более подробную информацию можно получить по запросу у Николаса Кина. Метод Число клеток оценивается по окрашиванию кристаллическим фиолетовым. Вкратце, клетки в 96-луночных планшетах фиксируют 1% глутаровым альдегидом. Затем клетки окрашивают 0,1% кристаллическим фиолетовым. Несвязанный краситель удаляется промыванием водой. Связанный кристаллический фиолетовый растворяют 0,2% Triton X-100. Погашение света, которое линейно увеличивается с увеличением числа клеток, анализируется при 570 нм с использованием ридера для ELISA.

Группа Продуктов : Эпигенетика > Ингибитор аврора-киназы