.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 326,37 RKI-1447 - мощный ингибитор ROCK1 и ROCK2 с IC50 14,5 нМ и 6,2 нМ, соответственно, обладает противоинвазивной и противоопухолевой активностью. \ n Биологическая активность. Активность RKI-1447 представляет собой проницаемую для клеток пиридилтиазолил-мочевину, которая действует как мощный, нацеливающий на сайт АТФ ингибитор Rho-киназы, проявляя значительно сниженную активность в отношении PKA, PKN1 / PRK1, p70S6K / RPS6kB1, AKT1, MRCKa / CDC42BPA (85,5% 80,5%, 61,9%, 56,0% и 50,4% ингибирования соответственно 1 мкМ RKI-1447) или 15 других киназ. Кристаллические структуры комплекса RKI-1447 / ROCK1 показывают, что RKI-1447 является ингибитором киназы типа I, который связывает сайт связывания АТФ посредством взаимодействий с шарнирной областью и мотивом DFG. RKI-1447 подавляет фосфорилирование субстратов ROCK MLC-2 и MYPT-1 в раковых клетках человека, но не влияет на уровни фосфорилирования киназ AKT, MEK и S6 при концентрациях до 10 мкМ. RKI-1447 также обладает высокой селективностью при ингибировании ROCK-опосредованной реорганизации цитоскелета (образования актиновых стрессовых волокон) после стимуляции LPA, но не влияет на формирование PAK-опосредованных ламеллиподий и филоподий после стимуляции PDGF и брадикинином. RKI-1447 подавляет миграцию, инвазию и независимый от закрепления рост опухолевых клеток рака груди. RKI-1447 очень эффективен при подавлении роста опухолей молочной железы в модели трансгенных мышей. Опухоли мышей, получавших RKI-1447, увеличиваются в размере, при этом среднее процентное изменение объема опухоли составляет всего 8,8%. Таким образом, RKI-1447 ингибировал рост опухоли молочной железы на 87%, и в среднем опухоли молочной железы. По сравнению с опухолями мышей, получавших контрольный носитель, мышей, получавших RKI-1447, были в 7,7 раза меньше. Обработка RKI-1447 не приводит к потере веса мышей. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [2]
|
Z-Lyte FRET kinase assay
|
Kinase inhibition is measured using the Invitrogen Z-Lyte® FRET kinase assay with Ser/Thr 13 peptide substrate based on the myosin light chain sequence KKRPQRRYSNVF. Compounds are tested on three separate days with 8 point dilutions performed in duplicate to determine average IC50 values. The assay conditions are optimized to 15 μL of kinase reaction volume with 5 ng of enzyme in 50 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, and 0.01% Brij-35. The reaction is incubated for 1 h at room temperature in the presence of 1.5 μM of peptide substrate with 12.5 μM of ATP (for ROCK1) or 2 μM of substrate with 50 μM of ATP (for ROCK2). The reaction is then stopped and the ratio of phosphorylated to unphosphorylated peptides is determined by selective cleavage of only the unphosphorylated peptide as described by the manufacturer. This is followed by excitation of coumarin at 400 nm resulting in emission at 445 nm and energy transfer to fluorescein and final emission at 520 nm. The substrate contains both coumarin and fluorescein and only uncleaved phosphorylated substrate will undergo FRET. The ratio of the signals at 445 nm and 520 nm is measured using a Wallac EnVision Plate Reader, model 2102 plate-reader.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
MDA-MB-231
|
|
Concentrations
|
~600 μM
|
|
Incubation Time
|
72 h
|
|
Method
|
Cells are plated in a 96 well tissue culture plate (1200 cells per well) and incubated for 24 hours. After incubation the cells are treated with vehicle or increasing concentrations of RKI-1447 for 72 hours. After
incubation, freshly prepared MTT (2mg/ml) is added to each well and incubated for 3 hours. After incubation the plates are read at 540 nm.
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
MMTV/neu transgenic mice [FVB/N-Tg (MMTVneu) 202 Mul/J]
|
|
Formulation
|
20%-2-hydroxypropyl-betacyclodextrin(HPCD)
|
|
Dosages
|
200 mpk/day
|
|
Administration
|
i.p.
|
|
Solubility
|
15% Captisol,
30 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
326.37
|
|
Formula
|
C16H14N4O2S
|
|
CAS No.
|
1342278-01-6
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
65 mg/mL
(199.16 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
In vivo
|
15% Captisol
|
30 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
Urea, N-[(3-hydroxyphenyl)methyl]-N'-[4-(4-pyridinyl)-2-thiazolyl]-
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Клеточный цикл > Ингибитор РОК
