ЗСТК474 475110-96-4

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 417,41 ZSTK474 ингибирует изоформы PI3K класса I с IC50 37 нМ, в основном PI3Kδ. Фаза 1/2. \ N ZSTK474 в концентрации 1 мкМ сильно снижает активность PI3K до 4,7% от контрольного уровня, тогда как LY2194002 снижает активность только до 44,6% от контроля. ZSTK474 ингибирует активность рекомбинантных p110β, -γ и -δ с IC50 17 нМ, 53 нМ и 6 нМ соответственно. ZSTK474 проявляет сильную антипролиферативную активность против панели из 39 линий раковых клеток человека со средним GI50 0,32 мкМ, более эффективно, чем LY294002 или вортманнин со средним GI50 7,4 мкМ или 10 мкМ, соответственно. Обработка ZSTK474 в дозе 1 мкМ блокирует взъерошивание мембран и образование PIP3, индуцированное тромбоцитарным фактором роста в эмбриональных фибробластах мыши (MEF). ZSTK474 в концентрации 10 мкМ индуцирует апоптоз в клетках OVCAR3 и вызывает полную остановку фазы G1, но не вызывает апоптоз в клетках A549. Обработка ZSTK474 в дозе 0,5 мкМ значительно снижает уровень фосфорилированных Akt и GSK-3β, а также экспрессию белка циклина D1. ZSTK474 также ингибирует фосфорилирование других нижестоящих компонентов передачи сигналов, которые участвуют в регуляции пролиферации клеток, включая FKHRL1, FKHR, TSC-2, mTOR и p70S6K, в зависимости от дозы. ZSTK474 не ингибирует mTOR при 0,1 мкМ, и даже при концентрации 100 мкМ ZSTK474 подавляет активность mTOR менее чем на 40%. ZSTK474 блокирует VEGF-индуцированную миграцию клеток и образование трубок в эндотелиальных клетках пупочной вены человека (HUVEC) и ингибирует экспрессию HIF-1α и секрецию VEGF в клетках RXF-631L, проявляя сильную антиангиогенную активность in vitro. Обработка ZSTK474 подавляет продукцию IFNγ и IL-17 в Т-клетках, активированных конканавалином А, и подавляет пролиферацию и продукцию PGE (2) фибробластоподобными синовиальными клетками (FLS). \ п

Inhibition of PI3K activity

A549 cells are lysed in a buffer containing 20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 150 mM NaCl, 5 mM EDTA, and 1% Igepal CA-630, the lysates are centrifuged at 20,000 g and 4 °C for 10 minutes, and the supernatants are used as cell lysate (protein = 2-4 mg/mL). To immunoprecipitate PI3K, 200 μL of cell lysate are incubated with anti-p85 polyclonal antibody and protein G-agarose (5 μL). PI3Kα, PI3Kβ, and PI3Kδ can be immunoprecipitated by the anti-p85 polyclonal antibody. Agarose beads containing immunoprecipitates are washed twice with buffer A (20 mM Tris-HCl at pH 7.5, 150 mM NaCl, 5 mM EDTA, and 1% Igepal CA-630), once with buffer B (500 mM LiCl and 100 mM Tris-HCl at pH 7.5), once with distilled water, and once with buffer C (100 mM NaCl and 20 mM Tris-HCl at pH 7.5). Immunoprecipitates are suspended in 20 μL of buffer C containing phosphatidylinositol of 200 μg/mL. The mixture is preincubated with increasing concentrations of ZSTK474 at 25 °C for 5 minutes. [γ-32P]ATP (2 μCi per assay mixture; final concentration, 20 μM) and MgCl2 (final concentration, 20 mM) are added to start the reaction. The reaction mixture is incubated at 25 °C for 20 minutes. Phosphorylated products of phosphatidylinositol are separated by thin-layer chromatography and visualized by autoradiography. The phosphatidylinositol-3-phosphate region is scraped from the plate, and radioactivity is also measured with liquid scintillation spectroscopy. The level of inhibition for ZSTK474 is determined as the percentage of 32P counts per minute obtained without ZSTK474.

Клеточный анализ: [1]

Cell lines	MCF-7, HT-29, HCT-116, OVCAR3, A549, et al.
Concentrations	Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM
Incubation Time	48 hours
Method	Cells are exposed to increasing concentrations of ZSTK474 for 48 hours. The inhibition of cell proliferation is assessed by measuring changes in total cellular protein by use of a sulforhodamine B assay. Apoptosis is assessed by chromatin condensation or by flow cytometry. For chromatin condensation assay, cells are stained with Hoechst 33342 and examined by fluorescence microscopy. Morphologic changes induced by ZSTK474, such as the condensation of chromatin, are indicative of apoptosis. For flow cytometry analysis, cells are harvested, washed with ice-cold PBS, and fixed in 70% ethanol. Cells are then washed twice with ice-cold PBS again, treated with RNase A (500 μg/mL) at 37 °C for 1 hour, and stained with propidium iodide (25 μg/mL). The DNA content of the cells is analyzed with a flow cytometer.

Исследование на животных: [1]

Animal Models	Male BDF1 mice injected subcutaneously with B16F10 cells, and female BALB/c nude mice inoculated subcutaneously with A549, PC-3, or WiDr cells
Formulation	Suspended in 5% hydroxypropylcellulose in water as a solid dispersion form
Dosages	~400 mg/kg/day
Administration	Orally
Solubility	0.5% hydroxyethyl cellulose, 30 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Химическая информация

Molecular Weight (MW)	417.41
Formula	C19H21F2N7O2
CAS No.	475110-96-4

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	21 mg/mL (50.31 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	<1 mg/mL (
	In vivo	0.5% hydroxyethyl cellulose	30 mg/mL
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	2-(difluoromethyl)-1-(4,6-dimorpholino-1,3,5-triazin-2-yl)-1H-benzo[d]imidazole

Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы

Группа Продуктов : PI3K / Akt / mTOR > Ингибитор PI3K