.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 425,48 PF-04691502 представляет собой АТФ-конкурентный двойной ингибитор PI3K (α / β / δ / γ) / mTOR с Ki 1,8 нМ / 2,1 нМ / 1,6 нМ / 1,9 нМ и 16 нМ, низкая активность против Vps34, AKT, PDK1, p70S6K, MEK, ERK, p38 или JNK. Фаза 2. \ n PF-04691502 эффективно ингибирует рекомбинантные PI3K и mTOR класса I в биохимических исследованиях и подавляет трансформацию птичьих фибробластов, опосредованную PI3K γ, δ дикого типа или мутантным PI3Kα. В PIK3CA-мутантных и удаленных по PTEN линиях раковых клеток PF-04691502 снижает фосфорилирование AKT T308 и AKT S473 (IC (50) 7,5-47 нМ и 3,8-20 нМ, соответственно) и ингибирует пролиферацию клеток (IC (50) 179-313 нМ). PF-04691502 ингибирует активность mTORC1 в клетках, измеренную с помощью PI3K-независимого стимулируемого питательными веществами анализа, с IC (50) 32 нМ и ингибирует активацию нижестоящих эффекторов PI3K и mTOR, включая AKT, FKHRL1, PRAS40, p70S6K, 4EBP1 и S6RP. . Кратковременное воздействие PF-04691502 преимущественно ингибирует PI3K, тогда как ингибирование mTOR сохраняется от 24 до 48 часов. PF-04691502 индуцирует остановку клеточного цикла G (1), одновременно с активацией p27 Kip1 и снижением Rb. \ n Противоопухолевая активность PF-04691502 наблюдается в ксенотрансплантатах немелкоклеточной карциномы легкого U87 (PTEN null), SKOV3 (мутация PIK3CA) и устойчивых к гефитинибу и эрлотинибу. PF-04691502 подавляет рост опухоли через 7 дней на 72%. Визуализация FDG-PET показала, что PF-04691502 резко снижает метаболизм глюкозы. Тканевые биомаркеры активности пути PI3K / mTOR, p-AKT (S473) и p-RPS6 (S240 / 244), также резко ингибируются после обработки PF-04691502. \ п
|
Kinase Assay
|
The fluorescence polarization assay for ATP competitive inhibition is done as follows: mPI3Kα dilution solution (90 nM) is prepared in fresh assay buffer (50 mM Hepes pH 7.4, 150 mM NaCl, 5 mM DTT, 0.05% CHAPS) and kept on ice. The enzyme reaction contains 0.5 nM mouse PI3Kα (p110α/p85α complex purified from insect cells), 30 μM PIP2, PF-04691502 (0, 1, 4, and 8 nM), 5 mM MgCl2, and 2-fold serial dilutions of ATP (0–800 μM). Final dimethyl sulfoxide is 2.5%. The reaction is initiated by the addition of ATP and terminated after 30 minutes with 10 mM EDTA. In a detection plate, 15 uL of detector/probe mixture containing 480 nM GST-Grp1PH domain and 12 nM TAMRA tagged fluorescent PIP3 in assay buffer is mixed with 15 uL of kinase reaction mixture. The plate is shaken for 3 minutes, and incubated for 35 to 40 minutes before reading on an LJL Analyst HT.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
BT20, U87MG, and SKOV3 cells
|
|
Concentrations
|
0-3 mM
|
|
Incubation Time
|
3 days
|
|
Method
|
BT20, U87MG, and SKOV3 cells are plated at 3,000 cell/well in 96-well culture plates in growth medium with 10% FBS. Cells are incubated overnight and treated with DMSO (0.1% final) or serial diluted compound for 3 days. Resazurin is added to 0.1 mg/mL. Plates are incubated at 37 °C in 5% CO2 for 3 hours. Fluorescence signals are read as emission at 590 nm after excitation at 530 nm. IC50 values are calculated by plotting fluorescence intensity to drug concentration in nonlinear curve
|
Исследование на животных: [2]
|
Animal Models
|
LSL-KrasG12D heterozygous mice (B6.129-Kras tm4Tyj) and Ptendel mice (c;129S4-Pten tm1Hwu/J), Orthotopic transplant of ovarian tumors
|
|
Formulation
|
0.5% methylcellulose
|
|
Dosages
|
daily at either 7.5 or 10 mg/kg
|
|
Administration
|
Administered via oral gavage
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация Download PF-04691502 SDF
|
Molecular Weight (MW)
|
425.48
|
|
Formula
|
C22H27N5O4
|
|
CAS No.
|
1013101-36-4
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
14 mg/mL
(32.9 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
2-amino-8-((1r,4r)-4-(2-hydroxyethoxy)cyclohexyl)-6-(6-methoxypyridin-3-yl)-4-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : PI3K / Akt / mTOR > Ингибитор PI3K
