.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 428,43 Вортманнин - первый описанный ингибитор PI3K с IC50 3 нМ, с небольшой селективностью в семействе PI3K. Также блокирует образование аутофагосом и сильно ингибирует ДНК-PK / ATM с IC50, равным 16 нМ и 150 нМ. \ n На ингибирование КЛЦМ с помощью вортманнина не влияет кальмодулин или пептидный субстрат, но он снижается высокой концентрацией АТФ. Вортманнин напрямую взаимодействует с каталитическим доменом КЛЦМ и приводит к необратимой потере активности фермента. Вортманнин не ингибирует цАМФ-зависимую протеинкиназу, цГМФ-зависимую протеинкиназу и кальмодулин-зависимую протеинкиназу II и мало влияет на активность протеинкиназы С. Вортманнин ингибирует образование PtdInsP3 (фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфата), стимулированное N-формилметионил-лейцилфенилаланином (fMLP), с IC50 5 нМ, и это ингибирование полностью отменяется при предварительной обработке 100 нМ вортманнина с повышением уровня PtdInsP2 в человеческих нейтро-нейтронах. не влияет на клеточное содержимое PtdInsP и PtdIns. Вортманнин может вызывать колебательные изменения в содержании F-актина и не ингибирует стимулированную fMLP полимеризацию актина в нейтрофилах. Вортманнин необратимо подавляет активность фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3-киназы), связываясь с белком массой 110 кДа (IC50 3 нМ) и не влияет на PI4-киназу в клетках RBL-2H3. Вортманнин также подавляет секрецию гистамина, опосредованную Fc-эпсилон RI, и высвобождение лейкотриенов, не влияя на активацию тирозинкиназы Lyn. Вортманнин полностью устраняет индуцированное инсулином поглощение гексозы изолированными адипоцитами крысы в концентрации 0,1 мкМ, не нарушая липолитическую активность, стимулированную изопротеренолом. Вортманнин подавляет индуцированное инсулином производство оксида азота на 50% при 500 нМ в эндотелиальных клетках пупочной вены человека, что является ответом на IGF-1. Вортманнин подавляет репарацию двухцепочечных разрывов ДНК (DSB) и не влияет на уровни DSB или кинетику репарации одноцепочечных разрывов (SSB) в клетках яичников китайского хомячка при концентрации 50 мкМ. Вортманнин может усиливать цитотоксичность, вызванную ионизирующим излучением (ИК), но сам по себе не токсичен. Вортманнин ингибирует активность поло-подобной киназы (PLK1) со значением IC50 24 нМ в интактных G2 / M-арестованных клетках. Вортманнин увеличивает опосредованное Toll-подобным рецептором (TLR) накопление IL-6 в макрофагах человека с ЕС50 50 нМ. Между тем вортманнин значительно усиливает TLR-опосредованную экспрессию индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS) и накопление нитрита в макрофагах мыши. Вортманнин активирует ядерный фактор-κB и регулирует выработку мРНК цитокинов. Вортманнин также ингибирует Polo-like kinase (PlK) 1 и PlK3, которые играют важную роль в митозе. Обработка вортманнином может привести к снижению фосфорилирования p53 на серине 20, вызванного повреждением ДНК. Вортманнин подавляет индуцированное гиалуронаном фосфорилирование Akt и подвижность / миграцию клеток в клетках SW1990. Вортманнин подавляет перитонеальные метастазы SW1990 у мышей в дозе 1 мг / кг без потери веса. Вортманнин ингибирует фосфорилирование фосфатидилинозитид-3-киназа-протеинкиназа B (PKB) / Akt как в нормальных тканях (гомогенаты легких, сердца и головного мозга), так и в опухолевой ткани мышей без смертности или острой токсичности при дозе 0,7 мг / кг. В сочетании с LY188011 вортманнин значительно увеличивает апоптоз и подавляет рост опухоли в ортотопической опухоли, в то время как обе монотерапии не могут. \ N Протокол (только для справки) киназного анализа: [1]
|
MLCK assay
|
MLCK activity is assayed with peptide substrate (KKRPQRATSNVFS-NH2) or myosin light chain. The peptide substrate (24 μM) is phosphorylated in a reaction mixture containing 25 mM Tris-HC1 (pH 7.5), 0.5 mg/mL bovine serum albumin, 4 mM MgCl2, 0.5 mM CaCl2, 2.6 nM calmodulin, 1.5 nM MLCK, and 400 μM ATP in a final volume of 0.25 mL. After a 10-min preincubation at 28 ºC without ATP, the reaction is started by addition of ATP at 28 ºC and terminated by the addition of 0.1 mL of 10% (v/v) acetic acid after 30 min. The mixture is analyzed by high performance liquid chromatography: column, Unisil Pack 5C18 4.6 X 150 mm; solvent, 18% (v/v) acetonitrile, 0.1% (v/v) trifluoroacetic acid in water; flow rate, 1.0 mL/min; temperature, 40 ºC; detection, absorbance at 220 nm. Percent of reaction is calculated from the ratio of peak areas of phosphorylated form to those of unphosphorylated form. Specific activity measured under the conditions described above is 0.81 μmol/min/mg. Myosin light chain (108 μg/mL) is phosphorylated in a reaction mixture containing 25 mM Tris-HC1 (pH 7.5), 0.5 mg/mL bovine serum albumin, 4 mM MgCl2, 0.5 mM CaCl2, 4.2 nM calmodulin, 0.92 nM enzyme, and 10 μM[γ-32P]ATP (100-900 cpm/pmol) in a final volume of 0.25 mL. After a 3-min preincubation at 30 ºC without ATP, the reaction is started by the addition of [γ-32P]ATP at 30 ºC and stopped by the addition of 0.125 mL of trichloroacetic acid after 5 min. The acid-precipitable materials are collected on a nitrocellulose membrane filter and washed with four 1-mL aliquots of 5% (v/v) trichloroacetic acid. The radioactivity on the filter is measured in a toluene scintillation fluid, using a Packard Tri-Carb liquid scintillation spectrometer Model 4530. The specific activity measured under the conditions is 1.23 μmol/min/mg. [1]
|
|
PI3K assay
|
In an ordinary solution assay, partially purified PI3-kinase from calf thymus is used at a final concentration of 20 ng/mL. In the case of immunocomplex assay, P13-kinase activity is measured in immunoprecipitates with anti-PI3-kinase p85 antiserum, anti-
|
Исследование на животных: [11]
|
Animal Models
|
Human pancreatic adenocarcinoma cells PK1 are injected both s.c. and orthotopically into SCID mice.
|
|
Formulation
|
Dissolved at 0.4 mg/mL in DMSO, and diluted with 0.9% NaCl before use
|
|
Dosages
|
0.175, 0.35, and 0.7 mg/kg
|
|
Administration
|
Injected by i.v.
|
|
Solubility
|
1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80,
8 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
428.43
|
|
Formula
|
C23H24O8
|
|
CAS No.
|
19545-26-7
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
86 mg/mL
(200.73 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
In vivo
|
1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80
|
8 mg/mL
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
3H-Furo[4,3,2-de]indeno[4,5-h]-2-benzopyran-3,6,9-trione, 11-(acetyloxy)-1,6b,7,8,9a,10,11,11b-octahydro-1-(methoxymethyl)-9a,11b-dimethyl-, (1S,6bR,9aS,11R,11bR)-
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : PI3K / Akt / mTOR > Ингибитор PI3K
