.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 507,59 JNK-IN-8 - первый необратимый ингибитор JNK для JNK1, JNK2 и JNK4 с IC50 4,7 нМ, 18,7 нМ и 1 нМ,> 10-кратная селективность против MNK2, Fms и отсутствие ингибирования c-Kit, Met, PDGFRβ. \ n Биологическая активность JNK-IN-8 ингибирует фосфорилирование c-Jun в клетках HeLa и A375 с EC50 486 нМ и 338 нМ соответственно. JNK-IN-8 демонстрирует резкое улучшение селективности и устранение связывания с IRAK1, PIK3C3, PIP4K2C и PIP5K3. JNK-IN-8 требует Cys116 для ингибирования JNK2. JNK-IN-8 (10 мМ) подавляет стимулированное IL-1β фосфорилирование c-Jun в клетках IL-1R, установленном субстрате JNK. JNK-IN-8 ковалентно присоединяется к изоформам JNK, вызывая небольшое замедление электрофоретической подвижности изоформ JNK. Обнаружено, что JNK-IN-8 ингибирует киназу JNK с помощью широкого профиля селективности киназы библиотеки ингибиторов акриламидкиназы на основе структуры иматиниба с использованием подхода KinomeScan. JNK-IN-8 обладает отличной региохимией субструктур 1,4-дианилина и 1,3-аминобензойной кислоты по сравнению с иматинибом и использует боеголовку из N, N-диметилбутенового ацетамида для ковалентного нацеливания на Cys154. JNK-IN-8 принимает L-образную конформацию связывания типа I для доступа к Cys 154, расположенному по направлению к выступу сайта связывания АТФ. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
Binding Kinetics Assay
|
Binding kinetics assay A375 cells are pretreated with 1 μM JNK-IN-8 for the indicated amounts of time. Remove the medium and wash three times with PBS. Resuspend the cell pellet with 1 mL Lysis Buffer (1% NP-40, 1% CHAPS, 25 mM Tris, 150 mM NaCl, Phosphatase Inhibitor Cocktail, and Protease Inhibitor Cocktail). Rotate end to end for 30 min at 4℃. Lysates are cleared by centrifugation at 1.4×104 rpm for 15 min in the Eppendorf. The cleared lysates are gel filtered into Kinase Buffer (0.1% NP-40, 20 mM HEPES, 150 mM NaCl, Phosphatase Inhibitor Cocktail, Protease Inhibitor Cocktail) using 10DG columns. The total protein concentration of the gel-filtered lysate should be around 5–15 mg/ml. Cell lysate is labeled with the probe from ActivX at 5 μM for 1 hour. Samples are reduced with DTT, and cysteines are blocked with iodoacetamide and gel filtered to remove excess reagents and exchange the buffer. Add 1 vol of 2× Binding Buffer (2% Triton-100, 1% NP-40, 2 mM EDTA, 2× PBS) and 50 μL streptavidin bead slurry, and rotate end to end for 2 hours, centrifuge at 7,000 rpm for 2 min. Wash three times with 1× Binding Buffer and three times with PBS. Add 30 μL 1× sample buffer to beads; heat samples at 95℃ for 10 min. Run samples on an SDS-PAGE gel at 110V. After transferred, the membrane is immunoblotted with JNK antibody.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
507.59
|
|
Formula
|
C29H29N7O2
|
|
CAS No.
|
1410880-22-6
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
100 mg/mL
heating
(197 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
|
Chemical Name
|
Benzamide, 3-[[4-(dimethylamino)-1-oxo-2-buten-1-yl]amino]-N-[3-methyl-4-[[4-(3-pyridinyl)-2-pyrimidinyl]amino]phenyl]-
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : MAPK > Ингибитор JNK
