Nexturastat A 1403783-31-2

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 341,4 Nexturastat A - мощный и селективный ингибитор HDAC6 с IC50 5 нМ,> 190-кратная селективность по сравнению с другими HDAC. \ n \ n Биологическая активность В клетках меланомы мышей B16 Nexturastat A приводит к дозозависимому увеличению уровней ацетил-α-тубулина без сопутствующего повышения ацетилирования гистона H3. Кроме того, Nexturastat A сильно подавляет рост клеток меланомы B16 с GI50 14,3 мкМ. Анализы ингибирования HDAC. Анализы ингибирования HDAC выполняются компанией Reaction Biology Corp. с использованием выделенных человеческих рекомбинантных полноразмерных HDAC1 и -6 из системы экспрессии бакуловируса в клетках Sf9. Ацетилированный флуорогенный пептид RHKKAc, полученный из остатков 379-382 р53, используется в качестве субстрата. Буфер для реакции состоит из 50 мМ Трис-HCl pH 8,0, 127 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, 1 мМ MgCl2, 1 мг / мл БСА и конечной концентрации 1% ДМСО. Соединения доставляют в ДМСО и доставляют к смеси ферментов с предварительной инкубацией в течение 5-10 мин с последующим добавлением субстрата и инкубацией в течение 2 ч при 30 ° C. Трихостатин А и проявитель добавляются для гашения реакции и создания флуоресценции соответственно. Кривые "доза-ответ" строят, начиная с 30 мкМ соединения с трехкратными серийными разведениями, чтобы получить график с 10 дозами. Затем из полученных графиков генерируют значения IC50, и выраженные значения представляют собой среднее значение повторяющихся испытаний ± стандартное отклонение. \ n Метод B16. Клетки меланомы мыши высевают по 5000 на лунку в 96-луночные планшеты с плоским дном. На следующий день среду меняют на среду, содержащую различные концентрации HDACi или соответствующие концентрации носителя ДМСО, разбавленные полной средой, в трех повторностях. Клетки инкубируют 48 часов при 37 ° C и 5% CO2. Плотность жизнеспособных, метаболически активных клеток количественно определяют с помощью стандартного анализа MTS в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, 20 мкл реагента добавляют на лунку и инкубируют при 37 ° C в течение 3 часов. Поглощение при 490 нМ измеряли спектрофотометрически с вычитанием фона при 690 нМ. Затем все значения нормализуют и выражают как процент от среднего контроля (100%). \ п

Группа Продуктов : Эпигенетика > Ингибитор HDAC