LAQ824 (Дачиностат) 404951-53-7

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 379,459 LAQ824 (Dacinostat) - новый ингибитор HDAC с IC50 32 нМ и, как известно, активирует промотор p21. \ n \ n Биологическая активность LAQ824 активирует экспрессию ген, кодирующий ингибитор клеточного цикла p21, путем активации промотора p21 с 50% максимальной активации промотора (AC50) 0,30 мкМ. LAQ824 ингибирует рост клеток как H1299, линии немелкоклеточной карциномы легких, так и HCT116, линии клеток рака толстой кишки с IC50 0,15 мкМ и 0,01 мкМ соответственно, а антипролиферативный эффект LAQ824 является селективным по отношению к линиям опухолевых клеток. вызывая только остановку роста нормальных фибробластов. Кроме того, LAQ824 индуцирует дозозависимое увеличение белка p21 в клетках A549 и повышение гипофосфорилированного состояния супрессора опухоли Rb. Недавнее исследование показывает, что LAQ824 индуцирует изменения хроматина на уровне промотора гена IL-10, которые приводят к усиленному рекрутированию репрессоров транскрипции HDAC11 и PU.1 и ингибируют продукцию IL-10 в макрофагах мышей BALB / c. В ксенотрансплантатах опухолей толстой кишки человека HCT116 и голых мышей обработка LAQ824 в дозе 100 мг / кг оказывает ингибирующее действие на рост опухоли в дозозависимом режиме без общей цитотоксичности. \ n Анализ гистон-деацетилазы in vitro Ферменты HDAC частично очищают от лизата клеток H1299 с помощью ионообменной хроматографии с использованием колонки Q Sepharose Fast Flow. Ферментные комплексы собирают из 500 мг общего клеточного лизата иммунопреципитацией поликлональным антителом cdk2 или моноклональным антителом cdk1 / cdc2. Иммунопреципитаты ресуспендируют в киназном буфере (50 мМ Hepes, pH 8, 10 мМ MgCl2, 2,5 мМ ЭДТА, 1 мМ дитиотреитол, 20 мМ АТФ, 10 мМ β-глицерофосфат, 0,1 мМ NaVO4, 1 мМ фторид натрия, 50 мМ АТФ, 10 мкКи [γ-32P] АТФ) вместе с 1 мкг рекомбинантного белкового субстрата pRb (cdk2) или 10 мл смеси гистонов H1, содержащей 20 мкг субстрата (cdc2). Фосфорилированный гистон Rb и H1 разделяют с помощью электрофореза и количественно определяют с помощью PhosphorImager. \ n Метод Пролиферация клеток измеряется с использованием адаптированных опубликованных процедур (3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -5- (3-карбоксиметоксифенил) -2- (4-сульфонил) -2H-тетразолий). ). Клетки высевают в 12-луночные чашки и культивируют в среде RPMI 1640, содержащей 10% FBS. Клетки культивируют в присутствии различных концентраций TSA (до 1000 нг / мл). Чтобы изучить ингибирование роста TSA, количество жизнеспособных клеток определяют путем исключения красителя трипанового синего, считая на гемоцитометре типа Несбауэра в течение 0 часов, 24 часов и 48 часов. В среду RPMI 1640 добавляют такое же количество этанола, что и в контрольном эксперименте. Все эксперименты проводят в двух экземплярах и повторяют 3 раза. Среднее значение фона (обработка только средой) вычитается из каждой экспериментальной лунки; Значения в трех повторах усредняются для каждого разведения соединения. Для расчета процента роста используются следующие формулы: Если X0,% роста = (X-T0) / T0 * 100; Если X> T0,% роста = (X-T0) / (GC-T0) * 100. где T0 - среднее значение T0 - фон, GC - среднее значение необработанных клеток (в трех экземплярах) - фон, а X - среднее значение клеток, обработанных соединением (в трех экземплярах), - фон. [% Роста »наносится на график в зависимости от концентрации соединения и используется для расчета IC50 с использованием методов линейной регрессии между точками данных для прогнозирования концентрации соединений при 50% ингибировании.

Группа Продуктов : Эпигенетика > Ингибитор HDAC