.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 519,28 H 89 2HCl - мощный ингибитор PKA с Ki 48 нМ, в 10 раз селективнее в отношении PKA, чем PKG, более чем в 500 раз по сравнению с PKC, MLCK, кальмодулин киназой II и казеинкиназы I / II. \ N Биологическая активность H89 2HCl является мощным ингибитором PKA (cAMP-зависимой) протеинкиназы A с Ki 48 нМ, проявляет 10-кратную селективность по сравнению с PKG, проявляет> 500-кратную селективность по PKC, КЛЦМ, кальмодулинкиназа II и казеинкиназа I / II. Предварительная обработка клеток H-89 (30 мкМ) за 1 час до добавления форсколина заметно ингибирует индуцированное форсколином фосфорилирование белка в зависимости от дозы. H89 также ингибирует несколько других киназ с IC50 80, 120, 135, 270, 2600 и 2800 нМ для S6K1, MSK1, PKA, ROCKII, PKBα и MAPKAP-K1b соответственно. H89 также обладает активностью в отношении некоторых клеточных рецепторов и ионных каналов, включая Kv1.3 K + каналы, β1AR и β2AR.
Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]
|
PKA enzyme activity
|
cAMP-dependent protein kinase activity is assayed in a reaction mixture containing, in a final volume of 0.2 mL, 50 mM Tris-HC1 (pH 7.0), 10 mM magnesium acetate, 2 mM EGTA, 1 μM cAMP or absence of cAMP, 3.3-20 μM [γ-32P]ATP (4 × 105 cpm), 0.5 μg of the enzyme, 100 μg of histone H2B, and each compound, as indicated.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
PC12D
|
|
Concentrations
|
~30 μM
|
|
Incubation Time
|
1 h
|
|
Method
|
Levels of intracellular cAMP are determined. After 48 h in culture, PC12D cells are cultured in test medium containing 30 μM H-89 for 1 h and then exposed to fresh medium that contained both 10 μM forskolin and 30 μM H-89. Cells are scraped off with a rubber policeman and sonicated in the presence of 0.5 ml of 6% trichloroacetic acid. To extract trichloroacetic acid, 2 ml of petroleum ether is added, the preparation mixed and centrifuged at 3000 rpm for 10 min. After aspiration of the upper layer, the residue sample solution is used for determination.
|
Исследование на животных: [5] [6]
|
Animal Models
|
rat; mice
|
|
Formulation
|
Dissolved in 100% DMSO, diluted 1:20 in 0.9% sterile saline (Rat); 1% DMSO (Mice)
|
|
Dosages
|
20 or 200 mg/kg (Rat); 0-5 mg/kg (Mice)
|
|
Administration
|
s.c. (Rat); i.p. (Mice)
|
|
Solubility
|
1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80,
30 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
519.28
|
|
Formula
|
C20H20BrN3O2S.2HCl
|
|
CAS No.
|
130964-39-5
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
104 mg/mL
(200.27 mM)
|
|
Water
|
6 mg/mL
(11.55 mM)
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
In vivo
|
1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80
|
30 mg/mL
|
|
|
Chemical Name
|
(E)-N-(2-(4-bromocinnamylamino)ethyl)isoquinoline-5-sulfonamide dihydrochloride
|
Калькулятор молярности Калькулятор разведения Калькулятор молекулярной массы
Группа Продуктов : Другие > Ингибитор PKA
Протокол (только для справки) Анализ киназы: [1]