PP121 1092788-83-4

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 319,36 PP-121 - многоцелевой ингибитор PDGFR, Hck, mTOR, VEGFR2, Src и Abl с IC50 2 нМ, 8 нМ, 10 нМ, 12 нМ, 14 нМ и 18 нМ, также ингибирует ДНК-ПК с IC50 60 нМ. \ n Биологическая активность Селективность PP-121 взаимодействует внутри гидрофобного кармана, который сохраняется между тирозинкиназами и PI3K, а не серин-треонинкиназами. PP-121 образует водородную связь с Glu310 в Src, эффективно заменяя структурную роль каталитического лизина и приводя к упорядочению спирали C и стабилизации активной конформации. PP-121 также ингибирует другие PI3K, включая p110α и DNA-PK с IC50 52 нМ и 60 нМ соответственно. PP-121 эффективно и дозозависимо блокирует фосфорилирование Akt, p70S6K и S6 в двух линиях клеток глиобластомы, U87 и LN229. \ n PP-121 эффективно подавляет пролиферацию подмножества линий опухолевых клеток путем прямого ингибирования PI3K и mTOR. PP-121 вызывает остановку G0 / G1 в клетках LN220, U87 и Seg1. PP-121 также блокирует фосфорилирование тирозина, индуцированное v-Src, в клетках NIH3T3, трансформированных v-Src (Thr338). PP-121 может восстанавливать окрашивание актиновых стрессовых волокон в клетках NIH3T3, трансформированных v-Src (Thr338). \ n PP-121 в низкой концентрации 40 нМ ингибирует аутофосфорилирование Ret в клетках карциномы щитовидной железы TT, которые экспрессируют онкогенный мутант Ret C634W35. PP-121 ингибирует пролиферацию клеток с IC50 50 нМ в клетках карциномы щитовидной железы TT. PP-121 подавляет пролиферацию клеток, стимулированную только VEGF, с IC50 41 нМ в эндотелиальных клетках пупочной вены человека (HUVEC). PP-121 непосредственно ингибирует индуцированное Bcr-Abl фосфорилирование тирозина, что приводит к лекарственному апоптозу в клетках K562 и комбинации апоптоза и остановки клеточного цикла в клетках BaF3, экспрессирующих Bcr-Abl. Киназные анализы \ n Очищенные киназные домены инкубируют с PP-121 в 2- или 4-кратных разведениях в диапазоне концентраций от 1 нМ до 50 мкМ или с носителем (0,1% ДМСО) в присутствии 10 мкМ АТФ, 2,5 мкКи γ -32P-АТФ и субстрат. Реакции прекращаются нанесением пятен на нитроцеллюлозные или фосфоцеллюлозные мембраны, в зависимости от субстрата; затем эту мембрану промывают 5–6 раз для удаления несвязанной радиоактивности и сушат. Перенесенная радиоактивность количественно оценивается с помощью фосфорного изображения, и значения IC50 рассчитываются путем подгонки данных к сигмоидальной дозе-ответу с использованием программного обеспечения Prism. Метод. Для вестерн-блоттинга клетки выращивают в 12-луночных планшетах и ​​обрабатывают PP-121 в указанных концентрациях или носителем (0,1% ДМСО). Обработанные клетки лизируют, лизаты разделяют с помощью SDS-PAGE, переносят на нитроцеллюлозу и блоттируют. Для анализов пролиферации клеток клетки выращивают в 96-луночных планшетах, обрабатывают PP-121 в 4-кратных разведениях (10 мкМ - 0,040 мкМ) или носителем (0,1% ДМСО). \ n Через 72 часа клетки обрабатывают натриевой солью резазурина (22 мкМ) и определяют флуоресценцию. Значения IC50 рассчитываются с использованием программного обеспечения Prism. Для анализов пролиферации, включающих подсчет отдельных клеток, неприлипающие клетки высевают при низкой плотности (3–5% слияния) и обрабатывают PP-121 (2,5 мкМ) или носителем (0,1% ДМСО). Клетки ежедневно разводят трипановым синим и подсчитывают количество жизнеспособных клеток с помощью гемоцитометра. \ n Для анализа апоптоза и клеточного цикла клетки обрабатывают указанной концентрацией PP-121 или носителя (0,1% ДМСО) в течение 24–72 часов. Клетки либо окрашивают вживую с помощью AnnexinV-FITC, либо фиксируют этанолом и окрашивают йодидом пропидия. Популяции клеток разделяют с помощью проточного цитометра FacsCalibur; данные собираются с помощью программного обеспечения CellQuest Pro и анализируются с помощью программного обеспечения ModFit или FlowJo.

Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор PDGFR