(R) -Непикастат HCl 195881-94-8

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 331,81 (R) -Непикастат HCl, R-энантиомер непикастата HCl, является мощным и селективным ингибитором с IC50 25,1 нМ и 18,3 нМ для бычьего и человеческого дофамина. -β-гидроксилаза с незначительным сродством к двенадцати другим ферментам и тринадцати рецепторам нейротрансмиттеров. \ n \ n Биологическая активность (R) -Непикастат вызывает зависимое от концентрации ингибирование активности дофамин-β-гидроксилазы крупного рогатого скота и человека in vitro. (R) -Непикастат (30 мг / кг, перорально) снижает содержание норадреналина, содержание дофамина и соотношение дофамин / норадреналин в брыжеечной артерии и левом желудочке крыс со спонтанной гипертензией (SHR). \ n Исследования in vitro Активность дофамин-бета-гидроксилазы крупного рогатого скота и человека оценивается путем измерения превращения тирамина в октопамин. Человеческая дофамин-бета-гидроксилаза очищается из культуральной среды клеточной линии нейробластомы SK-N-SH. Анализ проводят при pH 5,2 и 32 ° C в среде, содержащей 0,125 М ацетата натрия, 10 мМ фумарата, 0,5 ± 2 мкМ CuSO4, 0,1 мг / мл каталазы, 0,1 мМ тирамина и 4 мМ аскорбата. В типичном анализе к реакционной смеси добавляют 0,5 ± 1 мкл фермента, а затем добавляют смесь субстратов, содержащую каталазу, тирамин и аскорбат, для инициирования реакции (конечный объем 0,2 мл). Образцы инкубируют с соответствующей концентрацией непикастата (RS-25560-197, S-энантиомер) или RS-25560-198 (R-энантиомер) или без нее при 37 ° C в течение 30-40 минут. Реакцию гасят стоп-раствором, содержащим 25 мМ ЭДТА и 240 мкМ 3-гидрокситирамин (внутренний стандарт). Образцы анализируют на октопамин с помощью жидкостной хроматографии высокого давления с обращенной фазой (ВЭЖХ) с обнаружением ультрафиолета (УФ) при 280 нМ. Цикл ВЭЖХ проводят при скорости потока 1 мл / мин с колонкой LiChroCART 125-4 RP-18 и изократическим элюированием 10 мМ уксусной кислотой, 10 мМ 1-гептан сульфоновой кислотой, 12 мМ тетрабутиламмонийфосфатом и 10% метанол. Остающийся% активности рассчитывается на основе контролей (без RS 25560), скорректирован с помощью внутренних стандартов и подогнан к нелинейной четырехпараметрической кривой «концентрация-ответ». Активность непикастата в отношении двенадцати выбранных ферментов и рецепторов определяется с помощью общепринятых анализов. Данные связывания анализируются с помощью итеративного подбора кривой для четырехпараметрического логистического уравнения. Значения Ki рассчитываются из значений IC50 по уравнению Cheng-Pruso €. Ингибирующая активность ферментов выражается как IC50 (концентрация, необходимая для 50% -ного ингибирования активности фермента).

Группа Продуктов : Метаболизм > Ингибитор гидроксилазы