ЭПЗ-6438 1403254-99-8

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 572,74 EPZ-6438 - мощный и селективный ингибитор EZH2 с Ki и IC50 2,5 нМ и 11 нМ, демонстрирующий 35-кратную селективность по сравнению с EZH1 и> 4500- по сравнению с 14 другими HMT. \ n Биологическая активность EPZ-6438 в зависимости от концентрации снижает глобальные уровни H3K27Me3 в клетках дикого типа или мутантных SMARCB1 и вызывает сильные антипролиферативные эффекты с IC50 в диапазоне от 32 до 1000 нМ в МРТ с удаленным SMARCB1 Сотовые линии. EPZ-6438 индуцирует экспрессию генов дифференцировки нейронов и ингибирования клеточного цикла, в то время как ингибирует экспрессию генов пути Hedgehog, MYC и EZH2. Антипролиферативный эффект EPZ-6438 усиливается преднизолоном или дексаметазоном в нескольких линиях мутантных клеток лимфомы EZH2. У мышей SCID, несущих ксенотрансплантаты sc G401, EPZ-6438 вызывает застой опухоли во время периода введения и вызывает значительную задержку роста опухоли с минимальным влиянием на массу тела. Биохимические методы EPZ-6438 инкубируют в течение 30 минут с 40 мкл на лунку 5 нМ PRC2 (конечная концентрация для анализа в 50 мкл составляет 4 нМ) в 1X буфере для анализа (20 мМ бицин [pH 7,6], 0,002% Tween-20, 0,005 % Желатина из бычьей кожи и 0,5 мМ DTT). 10 мкл на лунку смеси субстратов, содержащей буфер для анализа 3 H-SAM, немеченый SAM и пептид, представляющий остатки 21-44 гистона H3, содержащие С-концевой биотин (присоединенный к С-концевому лизину, блокированному амидом), добавляют для инициирования реакции. (оба субстрата присутствуют в конечной реакционной смеси при их соответствующих значениях Km, формат анализа называется `` сбалансированные условия ''. Конечные концентрации субстратов и состояние метилирования субстратного пептида указаны для каждого фермента. Реакции инкубируются в течение 90 минут при комнатной температуре и гасили 10 мкл на лунку 600 мкМ немеченого SAM. Затем переносили на 384-луночный флэш-планшет и промывали через 30 минут. на кривых роста (измеренных по содержанию АТФ) и плотности в течение 7 дней. За день до обработки соединением клетки высевают в 96-луночные планшеты в трех экземплярах (для периода 0-7 дней) или 6-луночные планшеты (для повторного посева на 7 день до конца курса). В день 0 клетки либо не обрабатывают, либо обрабатывают ДМСО, либо обрабатывают EPZ-6438, начиная с 10 мкМ и уменьшаясь в трех- или четырехкратном разведении. Планшеты считываются в день 0, день 4 и день 7 с использованием Cell Titer Glo, при этом соединение / среда пополняется на день 4. На 7 день шестилуночные планшеты трипсинизируются, центрифугируются и ресуспендируются в свежей среде для подсчета Vi-Cell. Клетки от каждой обработки повторно высевают с исходной плотностью в 96-луночные планшеты в трех экземплярах. Клеткам дают прилипнуть к планшету в течение ночи, и клетки обрабатывают, как на день 0. На 7, 11 и 14 дни планшеты считывают с помощью Cell Titer Glo, при этом соединение / среда пополняется на 11 день. используется для построения графика распространения с течением времени и расчета значений IC50. Для клеточного цикла и апоптоза клетки G401 и RD помещают на чашки диаметром 15 см в двух экземплярах с плотностью 1 × 106 клеток на чашку. Клетки инкубируют с EPZ-6438 в концентрации 1 мкМ, всего 25 мл, в течение 14 дней, при этом клетки снова расщепляют до исходной плотности посева на 4, 7 и 11 день. Анализ клеточного цикла и анализ TUNEL. выполняется с использованием проточного цитометра Guava в соответствии с протоколом производителя.

Группа Продуктов : Эпигенетика > Ингибитор гистон-метилтрансферазы