BRD4770 1374601-40-7

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Биологическая активность Биохимическая активность флюоро-иммуноанализа с усилением диссоциации G9a (DELFIA) проводится в белых непрозрачных 384-луночных планшетах, покрытых нейтравидином. Тестируемые соединения разбавляют до 12 мкг / мл в 50 мМ Трис-HCl pH 8,5, содержащем 4% ДМСО, и 10 мкл распределяют в лунки. В контрольные и контрольные лунки вводили только составной буфер. GST-G9a в концентрации 10 мкг / мл и SAM в концентрации 40 мкМ разбавляют в 50 мМ Tris HCl pH 8,5 / 10 мМ DTT и добавляют в объеме 20 мкл. В пустые лунки вводят только буфер Tris / DTT. Реакции инициируют добавлением 800 нМ субстрата H3 (1-20) -цисбиотина в 50 мМ Трис pH 8,5 в объеме 10 мкл и инкубируют при комнатной температуре в течение 60 минут. Планшеты промывают 3 раза 100 мкл промывочного буфера, и в каждую лунку добавляют 50 мкл улучшающего раствора. Флуоресценцию с временным разрешением измеряют через 45 минут с помощью визуализатора Viewlux Microplate Imager в течение 15 секунд с окном 354 мкс, задержкой 400 мкс, возбуждением при 360 нм и эмиссией при 618 нм. \ n Клетки PANC-1 засевают и обрабатывают BRD4770 в 6-луночных планшетах в течение 72 часов. Клетки трипсинизируются и тестируются на образование колоний в мягком агаре с использованием 96-луночного анализа трансформации клеток CytoSelect с использованием красителя CyQuant GR для измерения общих уровней нуклеиновых кислот в клетках. Флуоресценцию детектируют планшет-ридером Analyst HT с использованием набора фильтров 485/520 нм.

Группа Продуктов : Эпигенетика > Ингибитор гистон-метилтрансферазы