Пазопаниб HCl (GW786034 HCl) 635702-64-6

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 473,98 Пазопаниб (GW786034) - новый многоцелевой ингибитор VEGFR1, VEGFR2, VEGFR3, PDGFR, FGFR, c-Kit и c-Fms с IC50 10 нМ. , 30 нМ, 47 нМ, 84 нМ, 74 нМ, 140 нМ и 146 нМ соответственно. \ N Биологическая активность Пазопаниб сильно ингибирует VEGF-индуцированное фосфорилирование VEGFR2 в клетках HUVEC с IC50 8 нМ. Пазопаниб демонстрирует дозозависимое ингибирование роста во всех линиях клеток синовиальной саркомы, включая клетки SYO-1 и HS-SY-II. Пролиферация клеток SYO-1 и HS-SY-II подавляется даже при 1 мкг / мл пазопаниба и полностью исчезает при 5 мкг / мл. Пазопаниб вызывает остановку G1 и тем самым подавляет рост клеток синовиальной саркомы. Фосфорилирование Akts, GSK-3β, JNK, p70 S6-киназы и mTOR подавляется в обработанных пазопанибом клетках SYO-1 по сравнению с таковым в клетках, обработанных носителем. Пазопаниб в диапазоне от 20 мг / мл до 22,5 мг / мл показывает возрастающее снижение жизнеспособности клеток RPE. У мышей, получавших 30 мг / кг или 100 мг / кг пазопаниба, обнаруживается значительное снижение опухолевой нагрузки по сравнению с мышами, получавшими носитель или 10 мг / кг пазопаниба. Лечение пазопанибом хорошо переносится, и нет значительных различий в массе тела мышей в каждой группе. \ n Киназные ферментные анализы. Ферментные анализы VEGFR для VEGGR1, VEGFR2 и VEGFR3 проводят в формате гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF) в 384-луночных микротитровальных планшетах с использованием очищенного, экспрессированного бакуловирусом слитого белка глутатион-S-трансферазы (GST). кодирует каталитический c-конец киназ 1, 2 или 3 рецептора VEGFR человека. Реакции инициируют добавлением 10 мкл раствора активированной киназы VEGFR2 [конечная концентрация, 1 нМ фермента в 0,1 M HEPES, pH 7,5, содержащего 0,1 мг / мл бычьего сывороточного альбумина (БСА), 300 мкМ дитиотреитола (DTT)] до 10 мкл раствора субстрата [конечная концентрация, 360 нМ пептида (биотин-аминогексил-EEEEYFELVAKKKK-NH2), 75 мкМ АТФ, 10 мкМ MgCl2] и 1 мкл титрованного пазопаниба в ДМСО. Планшеты инкубируют при комнатной температуре в течение 60 мин, а затем реакцию гасят, добавляя 20 мкл 100 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA). После гашения добавляют 20 мкл реагентов HTRF (конечная концентрация, 15 нМ аллофикоцианина, связанного со стрептавидином, 1 нМ меченного европием антифосфотирозинового антитела, разведенного в 0,1 мг / мл BSA, 0,1 M HEPES, pH 7,5), и планшеты инкубируют минимум в течение 10 минут. Флуоресценцию при 665 нМ измеряли планшет-ридером Wallac Victor с временной задержкой 50 мкс. \ n Метод \ n Фосфорилирование VEGFR2 оценивается в HUVEC, стимулированном VEGF. HUVEC высевают на 10-сантиметровые планшеты, покрытые коллагеном типа I, в среде Clonetics EGM-MV в количестве 1,0-1,5 × 10 6 клеток / планшет. Через 24 часа конфлюэнтные клетки голодают по сыворотке в течение ночи, заменяя среду роста средой Clonetics EBM, содержащей 0,1% BSA, 500 мкг / мл гидрокортизона. Клетки обрабатывают пазопанибом в различных концентрациях в течение 1 часа с последующим добавлением 10 нг / мл VEGF или носителя в течение 10 минут. Клетки солюбилизируют в буфере для лизиса. VEGFR2 иммунопреципитируется с использованием антитела antitiflk-1 и анализируется электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) с последующим вестерн-блоттингом и обнаружением с помощью антифолк-1 или антифосфотирозинового (анти-P-тир-биотина) антитела. Уровень фосфорилирования VEGFR2 количественно определяется денситометрией и нормализуется к общему уровню VEGFR2. \ п

Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор FLT3