AG-490 (Тирфостин B42) 133550-30-8

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 294,30 AG-490 (тирфостин B42) является ингибитором EGFR с IC50 0,1 мкМ, в 135 раз более селективным для EGFR по сравнению с ErbB2, также ингибирует JAK2 без активности к Lck, Lyn, Btk, Syk и Src. \ n Биологическая активность AG-490 ингибирует пролиферацию клеток, управляемую HER-2, с IC50 3,5 мкМ. В соответствии со специфическим дозозависимым ингибированием конститутивно активированного JAK2 в клетках острого лейкоза (ALL) пре-B, AG-490 (5 мкМ) почти полностью блокирует рост всех клеток ALL, вызывая запрограммированную гибель клеток, без вредного воздействия на нормальный кроветворение. AG-490 не подавляет активность Lck, Lyn, Btk, Syk и Src. AG-490 (60-100 мкМ) блокирует конститутивную активацию Stat3sm и подавляет спонтанный, а также индуцированный интерлейкином 2 рост опухолевых клеток грибовидного микоза (MF) со значениями IC50 75 мкМ и 20 мкМ соответственно. AG-490 эффективно ингибирует IL-2-опосредованный рост Т-клеток человека с IC50 25 мкМ, блокируя активность JAK3 и STAT5a / b. Хотя один только AG-490 не влияет на пролиферацию клеток FDrv210H в концентрации 5 мкМ, AG-490 может действовать синергетически с STI571, усиливая его ингибирующее действие на пролиферацию, управляемую p210bcr-abl. AG-490 значительно подавляет конститутивную активацию Stat3 в клетках MOPC, MPC11 и S194, что приводит к сильному дозозависимому апоптозу. AG-490 (100 мкМ) ингибирует фосфорилирование Akt, ингибирует активацию ядерного фактора-κB и вызывает активацию GSK-3β, что приводит к снижению c-Myc. AG-490 (50 мкМ) может индуцировать апоптоз устойчивых к иматинибу клеток BaF3, экспрессирующих мутанты Bcr-Abl T315I и E255K. AG-490 в концентрации 30 мкМ ингибирует не только Epo-индуцированное фосфорилирование JAK2 дикого типа, но также и конститутивное фосфорилирование мутанта JAK2 V617F. AG-490 также эффективно ингибирует цитокин-независимый рост клеток, индуцированный мутантом JAK2 V617F в клетках BaF3. Введение AG-490 резко снижает количество клеток CD45 + и HLA-DR + с 48% и 46% в костном мозге нелеченых мышей, а также с 38% и 22% в селезенке необработанных мышей до недетектальных уровней. Введение in vivo AG-490 вызывает апоптоз опухолевых клеток мышиной миеломы, но не ингибирует опосредованную IL-12 активацию макрофагов и продукцию IFN-γ лимфоцитами. В соответствии с блокированием in vitro активности мутанта JAK2 V617F, обработка AG-490 в дозе 0,5 мг / день в течение 10 дней эффективно ингибирует индуцированный мутантом JAK2 V617F онкогенез и инвазию опухолевых клеток у мышей nude. Комбинированная терапия с использованием AG-490 и IL-12 вызывает более сильные противоопухолевые эффекты, чем любой агент по отдельности в модели опухоли миеломы мышей. \ n Автофосфорилирование киназы in vitro AG-490 растворяют в ДМСО 10% -H2O-этаноле 45%. Неочищенные экстракты мембран (0,125 мкг / мл) предварительно активируют EGF (20 нМ) в 50 мМ буфере HEPES, pH 7,6 и 125 мМ NaCl, в течение 15 минут при 4 ° C. Активность аутофосфорилирования киназы EGFR или ErbB2 анализируют при 4 ° C в течение 30 секунд в V-образных 96-луночных планшетах. Мембранные экстракты (8 мкл) добавляют в каждую лунку, содержащую реакционную смесь (12 мкл, 50 мМ, HEPES, pH 7,4, 125 мМ NaCl, 12 мМ M8Ac2, 2 мМ MnCl2, 1 мМ NaVO3, 1 мкМ АТФ и 1 мкКи [γ -32P] ATP, конечные концентрации) и возрастающие концентрации AG-490 (4 мкл). После прекращения добавления горячего буфера для образцов образцы обрабатывают на минигеле для электрофореза в 6% SDS-полиакриламидном геле, гели сушат и проводят авторадиографию в течение линейного периода времени воздействия. Полосы рецепторов сканируются денситрометрически, а результаты анализируются программой Ez-Fit. Для анализа аутофосфорилирования JAK2, JAK2 иммунопреципитируют с использованием антитела против JAK2 из лизатов клеток G2, предварительно обработанных в течение 16 часов возрастающими концентрациями AG-490 (0-50 мкМ). Затем иммунные комплексы подвергаются иммуноблоттингу с антителом против фосфотирозина. Дозозависимое ингибирование киназной активности in vitro демонстрируется путем оценки аутофосфорилирования JAK2.

Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор EGFR