AGI-6780 1432660-47-3

.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: \ n 481,51 AGI-6780 - мощный и селективный ингибитор мутанта IDH2 R140Q с IC50 23 нМ. \ n \ n Биологическая активность AGI-6780 сильно снижает (R) - Уровни 2-гидроксиглутарата (2HG) в клеточных линиях, эктопически избыточно экспрессирующих IDH2 / R140Q с EC50 20 нМ, с превосходной селективностью в отношении других дегидрогеназ. AGI-6780 отменяет индуцированный IDH2 / R140Q блок дифференцировки в клетках TF-1 и индуцирует бластную дифференцировку в первичных образцах пациентов с AML IDH2 / R140Q человека. Ферментативный анализ ингибиторов IDH. Соединение готовят в виде 10 мМ исходного раствора в ДМСО и разбавляют до 50-кратной конечной концентрации в ДМСО для получения 50 мкл реакционной смеси. Активность фермента IDH, превращающего альфа-кетоглутарат в 2-гидроксиглутарат, измеряется с использованием анализа истощения НАДФН. В анализе оставшийся кофактор измеряют в конце реакции с добавлением каталитического избытка диафоразы и резазурина, чтобы генерировать флуоресцентный сигнал, пропорциональный количеству оставшегося НАДФН. Активность фермента IDH в направлении превращения изоцитрата в альфа-кетоглутарат измеряется путем прямого связывания продукции НАДФН с превращением резазурина в резоруфин диафоразой. В обоих случаях резоруфин измеряется флуорометрически в Ex544 Em 590. Для анализа гомодимера IDH2 / R140Q и гетеродимера IDH2-R140Q / WT белок разбавляют до 0,31 мкг / мл в 40 мкл буфера для анализа (150 мМ NaCl, 50 мМ 3 фосфат калия pH 7,5, 10 мМ MgCl2, 10% глицерин, 0,05% БСА, 2 мМ β-меркапоэтанол), содержащий 5 мкМ НАДФН. Добавляют 1 мкл 50-кратного разведения соединения и смесь инкубируют в течение 16 часов при 25 ° C. Ферментативная реакция начинается с добавления 10 мкл буфера для анализа, содержащего 8 мМ альфа-кетоглутарата, и инкубируется при 25 ° C в течение 60 минут. Реакцию останавливают добавлением буфера для обнаружения (1X буфер для анализа, содержащего 36 мкг / мл диафоразы и 18 мкМ резазурина), инкубируют в течение пяти минут при комнатной температуре и считывают на считывающем устройстве SpectraMax 384.

Группа Продуктов : Метаболизм > Ингибитор дегидрогеназы